몫:
간장 국물 tripticaseína 기초, 준비 및 사용
그 간장 국물 tripticaseína 그것은 매우 영양가 있고 비 선택적 인 액체 배양 배지입니다. 그것의 다예 다제 때문에, 그것은 미생물학 실험실에서 가장 널리 사용되는 액체 배양 배지 중 하나입니다.
그것은 또한 국물 tripticasa 콩 또는 소화 된 카제인 콩으로 알려져 있으며 약어는 영어의 약자 인 TSB입니다 난 이해가 안돼. 스페인어로 된 두문자어 또는 CST. 그것의 용도는 그것의 구성 때문에 아주 다양하다. 그것은 triptein, 콩 펩톤, 염화나트륨, 인산 디 칼륨 및 포도당으로 구성되어 있습니다.
영양 요구가 많고 혐기성 박테리아 인 병원성 박테리아를 포함하여 임상 적으로 중요한 병원성 박테리아를 복제 할 수 있습니다. 일부 기회 균류 및 오염 물질도이 환경에서 발생할 수 있습니다.
높은 영양력으로 인해 미생물 오염을 감지하는 데 높은 민감도를 가지므로 USDA 동물 및 식물 건강 검사 서비스가 백신의 미생물 분석을 위해 선택했습니다..
마찬가지로, tripticase 콩 수프는 화장품 및 식품과 같은 산업 수준에서 제품의 미생물 연구를위한 다른 약전 (유럽 EP, 일본 JP 및 북미 USP)의 요구 사항을 충족시킵니다.
다른 한편으로는,이 매체가 그 유용성에도 불구하고 상대적으로 저렴하므로 대부분의 미생물학 실험실에 적당하다는 것을 언급 할 가치가 있습니다. 또한 준비가 매우 쉽습니다..
색인
- 1 재단
- 2 준비
- 2.1 Trypticamine 콩
- 2.2 - tripticasein 콩 국물의 변종
- 3 사용
- 4 씨앗
- 5 품질 관리
- 6 제한 사항
- 7 참고
재단
tripteína, peptone 및 glucose는 빠른 미생물 발달을위한 이상적인 배지로 바꾸기 위해 필수 영양 성분을 제공합니다.
약 6 ~ 8 시간의 배양은 이미 대부분의 미생물에서 성장을 볼 수 있습니다. 그러나, 성장을 위해 며칠간 지속될 수있는 느린 성장 균주가 있습니다.
염화나트륨과 인산 디 칼륨은 각각 삼투 평형과 pH 조절기로 작용한다. 성장의 존재는 매질에서 탁도의 출현에 의해 입증된다; 성장이 없다면 매체는 반투명하다..
밝은 색상으로 인해, 제품의 시작 부분에있는 이미지와 같이 안료의 생성을 관찰 할 수 있습니다. Pseudomonas aeruginosa.
준비
-트립신 콩 국물
tripticase 간장 국물을 준비하려면 탈수 된 상업용 배지 30g을 디지털 방식으로 측정하십시오. 다음 그것은 fiola에서 포함 된 증류수의 리터에서 녹는다.
혼합물을 5 분 동안 방치 한 다음, 열원으로 가져와 매체의 용해를 돕는다. 1 분간 끓여서 자주 흔들어야한다..
일단 용해되면 필요에 따라 적절한 크기의 튜브에 분산됩니다. 면봉이나 베이클라이트 캡이 달린 튜브를 사용할 수 있습니다. 이어서, 튜브를 오토 클레이브 내에서 121 ℃에서 15 분 동안 멸균한다.
배지의 pH는 7.3 ± 0.2이어야한다.
탈수 된 배양액의 색은 밝은 베이지 색이며 건조한 장소에서 10 ~ 35 ° C에서 보관해야한다는 점을 고려해야합니다. 준비된 육즙은 밝은 호박색이며 냉장고에 보관해야합니다 (2 ~ 8 ° C).
-tripticasein 간장 국물의 변형
트립신 수정 대두 육수는 담즙과 노보비신을 첨가하여 분리를 위해 선택적으로 만들 수 있습니다. 대장균. 동일한 목적을위한 또 다른 선택 사항은 vancomycin, cefixime 및 tellurite (2.5 μg / ml)를 보충 한 tripticase soy broth를 준비하는 것입니다..
한편, 목적이 생물막 형성을 자극하는 경우 trypticasein soy broth에 더 많은 포도당 (0.25 %)을 첨가 할 수 있습니다.
사용
그것은과 같은 까다로운 또는 성가신 박테리아의 성장을 허용 할만큼 충분히 영양가입니다. Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp 및 Brucella sp, 혈액이나 혈청을 보충 할 필요가 없다..
마찬가지로 일부 곰팡이는 다음과 같이 칸디다 알비 칸 복합체, 아스 페르 길 루스 속 전자 Histoplasma capsulatum.
또한, 혐기성 조건 하에서의이 배지는 임상 적으로 중요한 혐기성 비 - 포자 박테리아뿐만 아니라 클로스 트리 디움 속 (Clostridium genus)에 속하는 박테리아를 회수하는데 이상적이다..
Enterococcus와 다른 Group D Streptococcus의 성장에 6.5 % 염화나트륨을 사용할 수 있다면.
연구 수준에서는 다양한 프로토콜, 특히 생물막 또는 생물막을 형성하는 박테리아 연구에 매우 유용합니다. 또한 Kirby와 Bauer의 방법으로 항생제를 시행하는데 필요한 Mac Farland의 0.5 %에서 세균 현탁액을 준비하는데 사용됩니다.
이 경우 3 ~ 5 개의 유사한 모양의 콜로니를 취하여 trypticasein soy broth 4 ~ 5 ml에 유화시킨다. 그런 다음 35-37 ° C에서 2 시간에서 6 시간 동안 배양 한 다음 멸균 생리 식염수를 사용하여 원하는 농도로 조정합니다. Trypticase 간장 국물은 18에서 24 시간 동안 배양하지 않아야한다..
뿌려졌다.
샘플은 선택 배지에서 채취 한 직접 또는 계대 배양 한 순수 콜로니에 뿌릴 수 있습니다. 배양하기 전에 배지를 흐트러 뜨리지 않도록 접종 물을 작게해야합니다..
정상적으로는 37 시간 동안 aerobiosis에서 24 시간 동안 배양되지만, 이러한 조건은 요구되는 미생물에 따라 달라질 수 있습니다. 필요한 경우 혐기성 조건에서 37 ℃에서 며칠 동안 배양 할 수도 있습니다. 예를 들어, 까다로운 또는 느리게 성장하는 미생물은 최대 7 일 동안 배양 할 수 있습니다.
백신과 같은 약제 물질의 미생물 분석에서 프로토콜이 더 엄격합니다. 이 경우 성장이없는 육수는 14 일간 계속 배양 될 때까지 폐기되지 않습니다.
품질 관리
준비된 각 배치에 대해 무균을 입증하기 위해 1 또는 2 개의 튜브를 접종없이 배양해야합니다. 그것은 변함없이 남아 있어야한다..
또한 행동을 평가하기 위해 알려진 계통을 심을 수도 있습니다. 사용할 수있는 균주는 다음과 같습니다.
Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, 칸디다 알비 칸스 ATCC 10231, 바실러스 서브 틸리 스 ATCC 6633, 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ATCC 6538 또는 25923, 대장균 ATCC 8739, Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, 살모넬라 티피 무리 움 ATCC 14028.
모든 경우에있어서 성장은 각 미생물에 적합한 대기 및 온도 조건 하에서 만족해야한다.
제한 사항
-글루코오스의 발효는 산의 생성에 의해 배지의 pH를 감소시킨다. 이것은 산도에 민감한 일부 미생물의 생존에 바람직하지 않을 수 있습니다.
-균주를 유지하는 데는 권장하지 않습니다. 왜냐하면 산성도 이외에도 며칠 후에 박테리아가 영양분을 고갈시켜 환경을 열악하게 만드는 독성 물질이 축적되기 때문입니다.
-국물이 쉽게 오염되기 때문에 모든 멸균 프로토콜을주의 깊게 관리해야합니다..
-tripticasein soya broth를 준비한 후에는 broth를 다른 sterile tube로 옮기려하지 않습니다. 왜냐하면 이런 종류의 기동은 오염에 매우 취약하기 때문입니다.
참고 문헌
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