몫:
Selenite 국물 기초, 준비 및 사용
그 셀레 나이트 수프 선택적 액체 배양 배지입니다. Leifson은 Salmonella 속의 장내 병원성 박테리아의 존재가 의심되는 샘플의 농축을 위해 설계되었습니다..
이 수단은 미국 공중 보건 협회 (APHA)의 요구 사항을 충족, 따라서 대변 샘플, 소변, 액체 또는 고체 음식, 물 등의 살모넬라 균의 조사를 위해 허용됩니다.
그것이 소유하고있는 화학적 조성은 이러한 미생물의 회복을 선호하고 차례로 다른 사람들의 성장을 억제합니다. 그것은 Enterobacteriaceae 가족에 속하는 대부분의 박테리아에 주로 독성이 있습니다. 그러나, 그것은 또한 Shigella의 균주의 회복을 허용하고 Pseudomonas 및 Proteus의 성장을 억제하지 않습니다..
그것은 무수 수소 나트륨 셀레 나이트, 무수 인산 나트륨, 펩톤 및 유당으로 구성됩니다. 또한 시스틴이 첨가 된 변이체가 있기 때문에 이름이 셀레 나이트 - 시스틴 배지입니다.
현재 셀레 시스틴 배지의 사용은 얻어진 나트륨 테트라 티오 네이트 브로스와 같은 목적 살모넬라, 다른 선택 배지에서 관찰 된 것과 높은 회복률 상당하기 때문에, 바람직.
색인
- 1 재단
- 2 준비
- 2.1 - 셀레나
- 2.2 상업적인 매체의 준비
- 2.3 변형 셀레늄 - 시스틴 배지
- 3 용도
- 4 씨앗
- 5 품질 관리
- 6 제한 사항
- 7 참고
재단
수프에 들어있는 펩톤은 미생물의 적절한 개발을위한 영양소 역할을합니다. 살모넬라 균주는 펩톤을 질소, 비타민 및 아미노산의 공급원으로 사용합니다.
소듐 셀레 특히 가족 장내 세균은 장내 플로라 본 그람 양성균 가장 박테리아의 성장을 느리게 억제제 인 반면 유당은 발효 탄수화물이다. 인산 나트륨이 배지의 pH를 안정화 버퍼 인.
L- 시스틴을 함유 한 셀레 나이트 브로스 변이종의 경우,이 추가 화합물은 셀레 나이트의 독성을 최소화하는 환원제로서 살모넬라의 회복을 증가시킨다.
준비
-셀레 나이트 수프
혼합물의 성분이 있다면 다음과 같이 무게를 측정 할 수 있습니다 :
무수 나트륨 수소 셀레 나이트 4gr.
10 g의 무수 인산 나트륨.
펩 토나 5 gr.
유당 4 gr.
1 리터의 멸균 증류수에 화합물을 용해시킨다. 그것은 전체적으로 녹기 위해 약간 가열 될 수있다..
일부 실험실에서는 오토 클레이브를 사용해서는 안되기 때문에 매질을 10 분간 흘려서 살균합니다. 배지를 멸균하면 배양액을 사용할 때까지 냉장고에 보관할 수 있습니다..
또한 멸균하지 않고 멸균 시험관에 10 ~ 15ml를 직접 공급할 수도 있습니다.
이 경우 즉시 휴식하고 사용해야합니다. 매체는 살균되지 않기 때문에 나중에 사용하기 위해 냉장고에 보관할 수 없습니다..
-상업적 매체의 제조
상업용 배지가 이용 가능한 경우, 23g의 탈수 된 배지를 칭량하고 1 리터의 멸균 증류수에 용해시킨다. 가볍게 녹여 용해를 완료하십시오. 오토 클레이브에서 멸균하지 마십시오. 멸균 시험관에서 무균 적으로 10 또는 15 ml를 섭취한다..
배지의 최종 pH는 7.0 ± 0.2이어야한다..
탈수 된 배지의 색상은 베이지 색이며 준비는 투명하고 반투명 한 호박색입니다..
변형 셀레늄 - 시스틴 배지
그것은 셀레 나이트 수프의 동일한 화합물을 함유하고 있지만 시스틴 10mg이 첨가됩니다. 나머지 절차는 위에서 설명한 것과 정확히 동일합니다..
용도
이 매체는 질병이 급성기가 아니거나 무증상 환자 또는 건강한 운송인이있는 경우 역학 연구에 사용하기에 특별합니다..
살모넬라 (Salmonella) 속의 분리는 흔히 희소 한 방법으로 표본을 오염시키는 것으로 일반적으로 어렵습니다. 소량으로 존재 함은 많은 양으로 발견되는 다른 박테리아 속의 성장과 쉽게 겹쳐진다..
반면, 가공 식품을 가공하는 원료는 종종 열에 노출되고, 탈수 과정에, 소독제, 방사선 및 방부제 등이 사용됩니다..
따라서 원료에 존재하는 살모넬라 균은 상기 산업 공정에 제품을 제출함으로써 부당하게 취급됩니다. 마찬가지로, 대변과 같은 임상 샘플의 경우, 항생제로 치료받은 환자에서 유래 된 경우에는 약하게 나타날 수 있습니다..
따라서, 살모넬라의 존재 락토스 국물 사전 부화로 의심하고,이어서 셀레 농축 된 모든 샘플 (예 SS 아가 아가 크실 로스 매체 리신 옥시 콜레이트로 선택적 XLD를 복구 최적화 ), Hektoen의 장 한천 (HE)과 녹색 한천 -Bright 등.
뿌려졌다.
대변 표본의 경우 시료 1g을 취해 10 ~ 15ml의 셀레 나이트 수프가 든 튜브에 현탁하십시오. 대변이 액체 인 경우 1ml를 취하여 수프에 현탁하십시오. 직장 면봉의 경우 면봉 물질을 국물에 배출하십시오..
고체 식품 샘플에서 1 gr을 취해 셀레늄 수프에 현탁.
액상 음식에서 두 배 농도에 셀레늄 수염과 동등한 부분에서 섞으십시오.
소변 샘플 원심 분리기의 경우 상등액을 버리고 모든 퇴적물을 취하여 셀레늄 수프에 넣으십시오.
배양액을 37 ° C에서 24 시간 동안 배양합니다. 박테리아 성장은 탁도에 의해 입증됩니다. 42 ℃에서 인큐베이션하기 위해 샘플 당 추가 튜브를 포함 할 수있다. 이어서, 셀레 나이트 수프로부터 종자 선택적 고체 배지.
품질 관리
멸균을 제어하기 위해 접종하지 않은 각 배치의 셀레 나이트 수프를 37 ° C에서 24 시간 동안 배양합니다. 탁도가 없거나 매질의 색상이 변할 것으로 예상됩니다..
배지의 양호한 기능을 제어하기 위해, 공지 된 균주가 사용될 수있다 :
살모넬라 장염 균 ATCC 13076, 살모넬라 티피 무리 움 ATCC 14028, 살모넬라 콜레라 수이 스 ATCC 12011, 대장균 ATCC 25922 및 프로 테우스 미라 빌리스 ATCC 43071.
예상되는 결과는 다음과 같습니다.
- 처음 세 세균 균주의 경우 성장은 만족 스러울 것입니다.
- ~까지 대장균 부분 억제.
- 프로 테우스의 온건 한 성장.
제한 사항
중간 셀레늄 수염은 인간의 피부에 유독하므로 직접 접촉을 피해야합니다.
참고 문헌
- 37 ° C, 42 ° C에서 배양 모두 플로레스 Abuxapqui-J, PUC 프랑코 M, 헤레 Navarrete은-M, 거실 ROSEL M, 프랑코 Monsreal J. 비교 배지 소디움 셀레 나이트 및 나트륨 테트라 티오 네이트, 절연 살모넬라 균 운반 대 변의 대변. Rev Biomed 2003; 14 (4) : 215-220
- 영국 실험실. Selenito Caldo. 구매 가능 : britanialab.com
- Neogen Laboratories 셀레 니토 국물 구매 가능 : foodsafety.neogen.com
- -Pedraza 곤잘레스 J, 페레이라 -Sanandres N, 소도 -Varela Z, 헤르 -Aguirre E, 카마 Villarreal- J. 미생물 분리 살모넬라 균. 검출을위한 분자 도구 등이있다. 건강, Barranquilla 2014; 30 (1) : 73-94. 출처 : http://www.scielo.org.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott의 미생물 학적 진단. 12 ed. 편집 Panamericana S.A. 아르헨티나.