보겔 - 존슨 한천 기초, 준비 ​​및 사용



그 보겔 - 존슨 한천 선택적으로 차별화 된 배양 배지이며, 특히 포도상 구균 (Staphylococcus aureus). 이 매체는 1960 년 Zogovitz, Evans 및 Niven이 1955 년에 공식화 한 글리신 텔루 라이트 한천의 변형으로 보겔 (Vogel)과 존슨 (Johnson)에 의해 만들어졌습니다..

수정은 배지에 존재하는 만니톨의 농도를 증가시키고 pH 지시약을 첨가하는 것으로 구성된다. 현 수식 트립 티카 효모 추출물, 만니톨, 인산 칼륨, 염화 리튬, 글리신, 페놀 레드, 한천, 칼륨 텔루 용액 1 % 및 물로 구성되어있다.

Vogel-Johnson 한천처럼 다른 방법으로도 분리가 가능하다는 점에 유의해야합니다. S. aureus, 염장 된 만니톨 한천 및 베어드 파커 한천과 같은 여러 가지 물질을 포함한다. 이러한 의미에서 보겔 - 존슨 한천의 기초는 짠 만니톨 한천과 베어드 파커 한천 사이의 혼합물이라고 할 수 있습니다..

처음에는 S. aureus 그들은 만니톨을 발효시키고 pH 지시약을 황색으로 전환시킴으로써 구별된다. 반면에 두 번째로 S. aureus 텔 루륨을 텔 루륨으로 환원시키고 회색에서 검은 색 콜로니를 형성하는 것이 특징입니다. 두 특성 모두 Vogel-Johnson 한천에서 관찰됩니다.

이 매체는 그 대응 물과 마찬가지로, 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) 식품 샘플, 산업 제품 및 임상 샘플의 위생 관리.

색인

  • 1 재단
    • 1.1 영양소의 기여
    • 1.2 선택적 전력
    • 1.3 차동 전력
    • 1.4 삼투 성 균형 및 응고제
  • 2 준비
    • 2.1 1 % w / v 칼륨 텔 라이트 용액
    • 2.2 Vogel-Johnson 한천 배지
  • 3 사용
  • 4 품질 관리
  • 5 참고

재단

영양소의 기여

Vogel-Johnson 배지에는 triptein과 효모 추출물이 들어 있습니다. 두 물질 모두 박테리아 성장에 필요한 탄소 및 질소 공급원 역할을하는 장쇄 아미노산을 제공합니다. 이 배지에서 자랄 수있는 박테리아는이 물질들로부터 영양분을 섭취합니다..

선택적 전력

한천 보글 - 존슨 응고 효소 긍정적 인 포도상 구균의 개발을 장려하고, 그람 음성 세균과 심지어 일부 그람 양성의 성장을 억제 할 수 있습니다. 금지 물질은 칼륨 텔 라이트, 염화 리튬 및 글리신.

차동 전력

이 미분 매질을 만드는 물질은 만니톨과 칼륨 텔루 라이트입니다. 만니톨은 탄수화물이며, 산을 발효 할 때 노란색 빨간색에서 중간 회전을 그 pH를 표시 페놀 레드의 존재 덕분에 발생하는 발생.

무색의 텔루 라이트가 금속성의 텔루 라이드로 환원되는 경우 어두운 회색에서 검은 색으로 변합니다..

그 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ferments mannitol과 tellurite를 텔루르로 줄인다. 그렇기 때문에 전형적인 식민지 군집이 S. aureus 이 매체에서는 황색 매질로 둘러싸인 회색 또는 검은 색입니다..

박테리아는이 매체에 성장과 텔루를 줄이거 나 만니톨을 발효하지 않는 형태로 더욱 강렬한 이상의 인해 펩톤의 사용에 의해 매체의 알칼리화에 중간 빨간색으로 둘러싸인 원래 색상 투명 식민지.

반면에 텔루 라이트를 감소 시키지만 만니톨을 발효시키지 않는 박테리아는 짙은 붉은 색으로 둘러싸인 회색 또는 검은 색 식민지로 자랄 것입니다.

배지가 칼륨 텔 라이트 (calcium tellurite)를 첨가하지 않고 준비 되었다면, S. aureus 그들은 짠 mannitol agar에서와 같은 노란 매체에 의해 포위 된 노란 식민지로 발전 할 것입니다.

삼투 성 균형 및 응고제

인산 디 칼륨은 매질의 삼투압 균형을 유지하고 pH를 중성으로 조절합니다 7.2. 한천은 배양 배지에 견고한 일관성을 부여하지만.

준비

1 % 칼륨 텔 라이트 용액 (w / v)

이 용액은 탈수 된 매질에 포함되어 있지 않습니다. 오토 클레이브에서 멸균 할 수 없기 때문입니다. 이러한 이유로 그것은 별도로 준비되고 멸균 된 배지에 첨가됩니다..

일부 상업용 주택은 즉시 사용할 수있는 1 % 칼륨 텔 라이트 솔루션을 판매합니다. 실험실에서 준비하려면 다음과 같이하십시오.

칼륨 텔루 라이트 1.0g을 달아 증류수 100ml를 측정한다. 물의 일부에 칼륨의 텔루 라이트를 녹인 다음 100ml에 도달 할 때까지 물의 양을 완료하십시오. 여과법으로 용액을 소독한다..

보겔 - 존슨 한천 배지

건조한 배지 60g을 달아 증류수 1L에 녹인다. 혼합물을 완전히 용해시키기 위해 비등까지 가열한다. 용해 과정 동안 매질은 자주 교반된다..

15 파운드의 압력과 121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브에서 소독하십시오. 오토 클레이브에서 꺼내어 약 45 ~ 50 ℃의 온도에 도달 할 때까지 기다리십시오. 미리 준비한 칼륨 텔루 라이트 용액 20ml를 1 %.

믹스하고 멸균 페트리 접시에 부어. 나중에 사용하기 전까지 냉장고에 보관할 수 있도록 고형화 및 반전 순서를 따르십시오..

준비된 배지의 최종 pH는 7.2 ± 0.2이어야한다..

샘플을 심기 전에 플레이트가 주변 온도에 도달 할 때까지 기다리십시오..

준비된 매체의 색상은 빨간색입니다..

사용

그것의 격리를 위해 사용될 수 있지만 S. aureus 어떤 유형의 표본에서도 주로 의약품, 화장품 및 식품의 미생물 분석에 사용됩니다.

접종원을 조밀하게하는 것이 좋습니다. 씨앗 뿌리기는 백금 손잡이로 흘리거나 Drigalski 주걱으로 표면 처리하여 수행 할 수 있습니다.

플레이트는 35 ~ 37 ℃에서 24 ~ 48 시간 동안 곰팡이를 일으키며 배양됩니다.

품질 관리

Vogel-Johnson 배지의 품질 관리를 수행하기 위해 다음과 같은 대조 균주를 사용할 수 있습니다.

포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ATCC 25923, 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ATCC 6538, 표피 포도상 구균 ATCC 12228, 대장균 ATCC 25922 또는 프로 테우스 미라 빌리스 ATCC 43071.

예상되는 결과는 다음과 같습니다. S. aureus 황색 매질로 둘러싸인 검은 식민지로 만족스러운 성장. ~까지 S. epidermidis 적색 배지로 둘러 쌓인 반투명 또는 검은 색 식민지를 이용한 정규 성장.

마찬가지로, 대장균 총 저해가있을 것으로 예상되며, 프로 테우스 미라 빌리스 부분 또는 전체 억제; 그것이 자라면 아주 작을 것이고 식민지는 중간 적색으로 둘러싸인 검은 색이 될 것입니다.

참고 문헌

  1. BD 실험실. VJ (Vogel and Johnson Agar). 2006. 사용 가능 : bd.com
  2. 영국 실험실. 보겔 - 존슨 한천. 구매 가능 : britanialab.com
  3. 영국 실험실. 칼륨 텔루 라이트. 구매 가능 : britania.com
  4. Himedia 실험실. 보겔 - 존슨 한천 배지. 2018. 이용 가능 : himedialabs.com/TD/MU023.pdf
  5. 보겔 - 존슨 한천 기지. Merck Microbiology Manual. 제 12 판, 502-503 페이지. 구매 가능 지역 : 사용자 / 팀 / 다운로드
  6. Wikipédia의 기여자, "Ágar Vogel Jonhson", 백과 사전에 위키 백과,   disponível em : wikipedia.org.
  7. 베네수엘라 표준 Covenin 1292-89. (1989). 음식 격리 및 계산 포도상 구균 (Staphylococcus aureus). 구매 가능 지역 :sencamer.gob.ve