몫:
간장 한천 tripticaseína 기초, 준비 및 사용
그 트립 시카신 대두 한천 또는 trypticase soy agar는 단단하고 비 선택적이며 영양가있는 배지입니다. 영어 Trypticase Soy Agar에서 약어 TSA로 지정됩니다. 그것은 triptein, 콩 펩톤, 염화나트륨 및 아가 - 한천으로 구성되어 있습니다.
높은 영양력으로 인해 적당히 까다로운 미생물의 배양에 이상적입니다. 추가 보충제가없는 배지는 1 차 배양에 권장되지 않지만, 순수 균주를 계대 배양하고 생육 가능한 상태로 유지하는 데 매우 유용합니다..
또한,이 배지는 진단에 필요한 용혈의 패턴을 관찰하는 데 필요한 특히 혈액 한천과 같은 리치 미디어의 제조를위한 기초로서 그리고 분류군의 optochin 및 바시 트라 신 설치용 작용 Streptococcus pneumoniae 및 Streptococcus pyogenes 각각.
다른 한편, 항생제와 함께 사용하면 혼합 된 식물상의 샘플에서 임상 적 중요성을 갖는 통용적이고 엄격한 혐기성 미생물을 분리하는 것이 유용합니다..
마지막으로, tripticasein 간장 한천의 조성과 성능은 다른 약전 (유럽, 일본 및 북미)에 의해 설정된 요구 사항을 충족시킵니다..
색인
- 1 재단
- 2 준비
- 2.1 Tripticasein 간장 한천 플레이트
- 2.2 혈액이 보충 된 Tripticasein soy 한천 플레이트
- 2.3 가열 된 혈액이 보충 된 Tripticasein soy 한천 플레이트
- 2.4 tripticaseine 간장 한천의 쐐기
- 3 용도
- 4 씨앗
- 5 품질 관리
- 5.1 불임 제어
- 5.2 성장 조절
- 5.3 혈액이 보충 된 tripticasein soy agar의 용균 성장 및 양식 조절
- 6 참고 문헌
재단
박테리아의 적절한 개발을 위해서는 아미노산, 비타민, 퓨린 염기 및 피리 미딘과 같은 에너지 기여가 필수적입니다.
이러한 의미에서 triptein과 soy peptone은 이러한 영양소를 미생물에 제공하여 완전한 발육을 가능하게합니다. 그러나 까다로운 박테리아의 경우 농축을 증가시키기 위해 섬유화 된 혈액이나 가열 된 혈액으로이 한천을 보충 할 필요가 있습니다.
반면에, 항생제가 배지에 첨가되면, 그것은 선택 배지가됩니다. 리스테리아 (Listeria) 속의 종의 분리를 위해 0.6 % 효모 추출물을 추가 할 수 있으며 시스틴 텔루 라이트 (cystine tellurite)를 첨가 할 수 있습니다 및 어린 양의 피가 이상적입니다. Corynebacterium diphteriae.
마지막으로, 염화나트륨은 배지에 삼투 균형을 제공하고 한천은 견고한 일관성을 제공한다.
준비
트립 티카 제인 대두 한천 플레이트
trypticasein soy agar를 제조하기 위해서는 탈수 된 상업용 배지 40g을 디지털 방식으로 저울에 달아야합니다. fiola에 들어있는 증류수 1 리터에 용해.
혼합물을 5 분 동안 방치 한 다음, 열원으로 가져와 매체의 용해를 돕는다. 그것은 자주 휘젓고 1 ~ 2 분 동안 끓여야합니다. 이어서, 오토 클레이브 내에서 121 ℃에서 15 분간 멸균한다.
50 ° C로 식히고 멸균 배양 접시에 분배하십시오. 굳히고, 거꾸로하고, 칠판에 주문하고 냉장고에 보관하십시오..
배지의 최종 pH는 7.3 ± 0.2이어야한다..
탈수 된 배양액의 색깔은 밝은 베이지 색이며 10 ~ 35 ° C의 건조한 곳에 보관해야합니다.
그 부분을 위해 준비 한천은 밝은 호박색입니다. 준비된 판은 사용하기 전까지 냉장고에 보관해야합니다 (2 ~ 8 ° C)..
플레이트를 사용하기 전에 실온에 도달해야합니다..
혈액으로 보충 된 Tripticasein soy 한천 플레이트
블로하 한천은 50 ℃에서 트립 시카신 대두 한천을 냉각시킬 때 5 %의 디 피브린 화 혈액을 첨가함으로써 제조 하였다. 혼합물을 부드러운 움직임으로 회전시켜 균질화시킨다..
멸균 배양 접시에서 제공하십시오. 매체의 색깔은 체리 레드이어야한다..
가열 된 혈액이 보충 된 Tripticasein soy 한천 플레이트
TSA- 기재 혈액 한천을 제조하기 위해, 상기 한 절차는 동일하지만 오토 클레이브를 떠날 때 매체의 온도가 약 56 내지 70 ℃가 될 때까지 방치한다. 그 때 혈액은 매체가 갈색으로 변할 때까지 놓고 섞는다..
멸균 된 페트리 접시에서 제공하십시오. 색상은 초코 브라운.
트립 시카신 콩 간장 웨지
한천을 준비하는 절차는 접시에 설명 된 것과 동일하지만, 배양 접시에 배지를 제공하는 대신 베이클라이트 뚜껑이있는 멸균 전 튜브에 10 ~ 12ml에 배분됩니다.
이어서, 튜브를 121 ℃에서 15 분 동안 오토 클레이브한다. 떠날 때, 그들은 지원의 도움을 의지하고 스스로 응고하게한다..
준비된 쐐기는 표면에 뿌려져 일정 기간 동안 특정 요구되지 않는 생존 가능한 미생물을 유지하는 역할을합니다.
용도
Trypticasein soy agar는 다음과 같은 경우에 사용됩니다.
-대부분의 실험실에서 일상적으로 사용되는 고전 혈액 한천을 준비하기위한 기지.
-까다로운 박테리아의 격리.
-용혈 패턴의 관찰.
-진단 테스트 실행.
-특별한 혈액 한천을 준비하기위한 기초로서 Corynebacterium diphteriae, 텔루르 시스틴과 함께 및 어린 양의 피.
-양의 혈액 한천을 준비하기위한 기초로서, 특히 혐기성 균의 성장을위한 더 많은 카나마이신 - 반코마이신 Bacteroides sp.
-비 까다로운 균주 (Bacterioteca).
-물, 환경, 식품 및 화장품 샘플의 미생물 한도 연구에서의 미생물 호기성 계수.
뿌려졌다.
샘플은 혈액이나 다른 첨가제가 보충 된 trypticasein soy agar의 표면에 직접 뿌릴 수 있습니다. 고갈에 의해 뿌려진다..
반면, 첨가제가없는 tripticasein soy 한천 플레이트는 일반적으로 미생물 균주 (세균 또는 효모)를 계대 배양하는데 사용되며,.
품질 관리
불임 제어
각 제조 된 배치 무균 증명 37 ℃에서 24 시간 동안 1 개 또는 2 uninoculated 플레이트 또는 튜브를 배양해야 대두 한천 트립 기초로 제조 된 다양한 매체의 멸균을 확인하는 것이 권장된다. 모든 경우에 성장없이 유지해야합니다..
오염이 발견되면 전체 롯트를 폐기해야합니다.
성장 조절
trypticasein soy agar의 적절한 기능을 연구하기 위해 다음 세균 균주를 사용할 수 있습니다. 대장균 ATCC 8739, 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 및 Enterococcus faecalis ATCC 29212.
균주를 파종하고 37 ℃에서 24 시간 동안 에어로 바이오 시스에서 배양한다..
모든 경우 성장은 만족 스러울 것입니다..
복잡한 버섯도 사용할 수 있습니다. 칸디다 알비 칸스 ATCC 10231 및 아스 페르 길 루스 니제르 ATCC 16404. 두 균주 모두에서 좋은 성장이 기대된다..
혈액이 보충 된 tripticasein soy agar의 성장 조절 및 용혈 패턴
이 염기로 준비된 혈액 한천의 적절한 기능을 확인하기 위해 다음과 같은 균주를 사용할 수 있습니다. Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 및 Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.
그들은 파종하고 37 ℃에서 24 시간 동안 미 풍토 작용으로 배양한다..
모든 경우에있어 성장은 만족스러운 수준이어야합니다. S. pyogenes 베타 - 용혈 (콜로니 주변의 맑은 후광)과 S. pneumoniae 알파 용혈 (식민지 주위의 녹색 후광)을 관찰해야합니다.
참고 문헌
- 위키 피 디아 공헌자. Trypticase 나는 한천이다. 위키 백과, 무료 백과 사전. 2018 년 12 월 17 일 15시 47 분 UTC. https://en.wikipedia.org에서 다운로드 할 수 있습니다.
- 영국 실험실. Tryteine 콩 한천. 구매 가능 : britanialab.com
- Neogen Laboratories 콩 삼제경. 구매 가능 : foodsafety.neogen.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott의 미생물 학적 진단. 12 ed. 아르헨티나 Panamericana S.A 사설.
- BD 실험실 Trypticase 나는 Agar이다. 구매 가능 지역 : .bd.com