몫:
Agar Sabouraud 재단, 준비 및 사용
그 사부 라우 한천, Sabouraud 덱 스트로스 한천으로도 알려져 있으며, 특히 곰팡이의 분리 및 발달을 위해 효모, 곰팡이 및 더러 토 박테리아와 같이 농축 된 고형 배양 배지입니다..
그러므로이 방법은 임상 또는 비 임상 샘플에서 병원성 또는 기회주의 균의 존재를 조사하기 위해 미생물학 실험실에서 부족할 수 없습니다. 마찬가지로 Streptomyces 및 Nocardia와 같은 사상균의 성장에도 이상적입니다. 그것의 사용법은 매우 광범위하며 인간, 동물, 식물 및 산업계의 진균에 사용될 수있다..
이 매체는 유명한 피부과 전문의 인 Raimond Sabouraud에 의해 1896 년에 만들어졌습니다. Raimond Sabouraud는 주로 피부병에 의해 유발 된 두피의 장애에 대해 세계적으로 유명한 전문가가되었습니다..
그것의 창조는 매우 중요했기 때문에 그 이후로 사용되어 왔고 오늘날에도 계속 사용되고 있습니다..
곰팡이는 특별한 것이지만,이 미생물은 박테리아가 자랄 수 있기 때문에 혼합 된 식물상을 가지고있는 시료는 항생제가 함유되어 있어야하며 존재할 수있는 세균 군집의 성장을 억제해야합니다.
항생제의 선택은 당신이 회복시키고 자하는 곰팡이의 유형을 고려하여주의 깊게 만들어야합니다. 일부는 특정 물질의 존재 하에서 억제되기 때문에.
색인
- 1 재단
- 1.1 Sabouraud 덱스 트로 한천과 항생제의 가장 많이 사용되는 조합
- 2 준비
- 2.1 덱 스트로스 사부 라우 한천
- 2.2 Sabouraud 포도당 한천 (Emmons의 수정)
- 2.3 Sabouraud dextrose agar (Emmons의 변형)와 chloramphenicol
- 2.4 Dextrose Sabouraud Emmons agar와 cycloheximide
- 2.5 Dextrose Sabouraud 한천 (Emmons)과 chloramphenicol 및 cycloheximide
- 2.6 추가 할 수있는 다른 항생제
- 3 특별 고려 사항
- 4 품질 관리
- 5 용도
- 5.1 1 차 재배
- 5.2 포자 형성
- 5.3 보존
- 5.4 마이크로 문화
- 5.5 인간 연쇄학에서
- 5.6 동물 동학
- 5.7 환경 균 학적
- 5.8 산업 균류학
- 5.9 식물 균류학
- 6 참고 문헌
재단
Sabouraud 덱스 트로 오스 한천은 산성 pH 5.6 ± 0.2로 인해 원래의 배합이 약하게 선택성 인 배지입니다. 그러나 박테리아는 주로 장시간 잠복기에서 계속 개발 될 수 있습니다.
이 배지는 미생물 발달을위한 탄소와 질소 공급원을 제공하는 카제인 펩톤과 췌장 소화 동물 조직을 포함합니다.
그것은 또한 박테리아에 곰팡이의 성장을 호의를 보이는 에너지 원으로 작동하는 포도당의 높은 농도를 포함한다. 모두 일관된 일관성을 제공하는 한천 - 한천과 혼합.
반면, Sabouraud dextrose 한천은 항생제가 첨가되면 선택적 일 수 있습니다.
항생제를 사용하면 상처 샘플, 개방성 궤양 또는 큰 세균 오염이 의심되는 샘플에서 특히 유용합니다.
Sabouraud 덱스 트로 한천과 항생제의 가장 많이 사용되는 조합
-chloramphenicol과 Sabouraud 한천 : 효모와 사상균 복구를위한 이상적.
-Sabrobud 한천과 gentamicin 및 chloramphenicol :이 배지에서 거의 모든 사상 균류와 효모를 성장시키고 Enterobacteria, Pseudomonas 및 Staphylococcus를 포함한 많은 박테리아를 억제합니다.
-cycloheximide와 Sabouraud 한천 : 그것은 피부 또는 호흡기에서 샘플로 의심되는 한 이형 변성 곰팡이가있는 한 특히 유용합니다.
Cycloheximide는주의해서 사용해야합니다. 샘플에 오염 물질로 존재할 수있는 비병원성 또는 환경 균류 및 효모의 성장을 저해하는 데 사용되지만, 이는 또한 다음과 같은 일부 진균류의 증식을 억제합니다. 크립토 코커스 네오 포르 만 스, Aspergillus fumigatus, Allescheria boydii, Penicillium sp 및 다른 기회 균류.
-chloramphenicol과 cycloheximide가있는 Sabouraud 한천은 주로 이형 상 피부 균과 곰팡이를 분리하는데 사용됩니다. 기회 균성 균류의 일부 종을 억제한다는 단점이 있습니다. Candida no albicans, Aspergillus, Zygomycetes 또는 C. 네오 포르 만.
-Saburanud 한천과 클로람페니콜, 스트렙토 마이신, 페니실린 G 및 시클로 헥시 미드 : 박테리아와 부생 균으로 오염 된 샘플에 이상적입니다.하지만 박테리아와 부생 균의 성장을 저해하는 단점이 있습니다. 방선균과 노 칼디 아스, 위에 언급 된 기회주의 버섯 외에도.
준비
성분이 따로 있다면 다음과 같은 방법으로 준비 할 수 있습니다.
덱 스트로스 한천 사부 라우드
무게 :
- 40 gr 포도당
- 펩톤 10g
- 한천 한천 15 그램
- 증류수 1000ml를 측정한다.
모든 성분들이 혼합되고, pH는 5.6으로 조정됩니다. 용질을 끓여서 녹이고, 25 x 150 mm 튜브에 20 ml의 배지를 플랜지없이 면봉으로 분배한다..
다른 튜브 크기도 사용 가능 여부에 따라 사용할 수 있습니다..
그들은 압력 대기 (121 ℃)에서 10 분 동안 오토 클레이브됩니다. 고압 증기 멸균 시간을 초과하지 마십시오. 오토 클레이브를 떠날 때 튜브는 플루트 피크로 고형화 될 때까지 지지부로 기울어집니다..
또 다른 방법은 끓을 때까지 가열하여 성분을 녹이는 것입니다. 같은 오토 클레이브 fiola에서 10 분 후 페트리 접시에 20 ML을 배포.
이미 모든 성분이 들어있는 Sabouraud 덱스 트로 오스 한천 배지를 사용할 수 있다면 우리는 1 리터의 물에 대해 상업 집에서 지정한 양을 계량합니다. 나머지 단계는 위에서 설명한 단계와 동일합니다..
덱 스트로스 한천 사보 라우드 (Emmons의 변형)
무게 :
- 20 gr 포도당
- 펩톤 10g
- 한천 한천 17 gr
- 증류수 1000ml를 측정한다.
모든 성분들이 혼합되고, pH는 6.9로 조정됩니다. 앞의 경우와 같은 방법으로 진행하십시오..
모든 재료를 갖춘 중간 규모의 상업용 주택이 있습니다. 이 경우 무게를 측정하고 인서트.
사부 로우 덱 스트로스 한천 (Emmons의 변형)과 클로람페니콜
클로람페니콜 용액
- 클로람페니콜 (chloramphenicol) 염기 500mg
- 95 % 에탄올 100ml를 측정한다.
- 믹스
Sabouraud 덱스 트로 오스 한천 배지 (Emmons)를 위에서 설명한대로 준비하고, 또한 매질 1 리터에 대해 고압 증기 멸균 전에 chloramphenicol 저장 용액 10 ml를 첨가한다..
시클로 헥시 미드를 함유 한 덱 스트로스 한천 사부 라우에 모몬
Cycloheximide 원액
- 5 그램의 cycloheximide
- 100 ml의 아세톤
- 믹스
Sabouraud 덱스 트로 오스 한천 배지 (Emmons)를 이미 설명한대로 준비하고 추가로 배지 1L 당 10mL의 시클로 헥시 미드 원액을 가압 살균.
클로람페니콜 (chloramphenicol)과 시클로 헥시 미드 (cycloheximide)를 함유 한 서브로 우드 덱스 트로 한천
Sabouraud 덱스 트로 오스 한천 배지 (Emmons)를 위에서 설명한대로 준비하고 추가로 배지 1L 당 10mL의 chloramphenicol 원액과 10mL의 cycloheximide 원액을 가압 살균.
추가 할 수있는 다른 항생제
1 리터당 20,000 ~ 60,000 페니실린.
배지 1 리터당 30 mg 스트렙토 마이신.
둘 다 매체를 오토 클레이브 한 후, 약간 냉각시킨 (50-55 ° C).
1 리터당 0.04 g의 네오 마이신.
0.04 g의 겐타 마이신 (gentamicin).
특별 고려 사항
안전을 위해 포자의 분산과 흡입을 피하기 위해 페트리 접시보다는 쐐기 형 튜브 (플루트 피크로 기울어 짐)에 Sabouraud 덱스 트로 오스 한천을 심는 것이 좋습니다..
Semilarerobic 조건은 일부 균주에서 포자의 형성을 억제하는 것으로 나타 났으므로 Sabouraud 한천이있는 튜브에는 나사 캡이 아닌면으로 덮여 있어야합니다. Coccidioides immitis. 또한, 대부분의 곰팡이는 호기성이다.
나사 캡을 사용하는 경우 단단히 닫지 마십시오..
품질 관리
준비된 용지는 올바르게 작동하는지 확인하기 위해 품질 관리 기능이 있어야합니다. 이를 위해 특정 통제 균주를 뿌린다..
클로람페니콜 ATCC 균주가있는 Sabouraud 덱스 트로 오스 한천을 사용할 수 있습니다. 칸디다 알비 칸스, 그것은 훌륭한 성장을 가져야 만합니다. 다른 플레이트에 균주 접종 대장균, 완전히 금지되어야한다..
미생물이 자라지 않는 접종되지 않은 플레이트가 배양된다..
클로람페니콜 (chloramphenicol)과 시클로 헥시 미드 (cycloheximide)를 함유 한 사부 로우 덱스 트로 오 한천은 홍역 흰 곰팡이, 잘 발전해야합니다. 다른 플레이트에는 아스 페르 길 루스 플라 베스, 성장이 거의 없거나 성장이 없어야합니다. 또한, 미 접종 플레이트는 그 불임을 증명하기 위해 인큐베이션된다.
시클로 헥시 미드를 함유 한 사부 로우 덱 스트로스 한천의 경우, 칸디다 알비 칸스, 선모충 o 미세 구멍 뚫기, 좋은 성장을 보여야한다..
마찬가지로, 아스 페르 길 루스 플라 베스, 부족한 성장 또는 성장 없음을 보여줍니다. 마지막으로 무균 제어를 위해 접종되지 않은 플레이트를 배양하십시오.
용도
1 차 재배
Classic Sabouraud dextrose agar는 4 그램의 덱스 트로 오스를 함유하고 있으며 각 곰팡이의 특징적인 형태를 보여주기 때문에 1 차 분리 배지로서 우수합니다.
또한 안료의 생산을 입증하는 데 탁월합니다. 그러나, 이것은 포자 관찰을 관찰하는 가장 적절한 방법은 아니다.
성장을 권장하지 않습니다. 블래스트 마이 세스 데르 마티 티스, 존재하는 포도당의 고농도에 의해 저해된다..
다른 한편으로, 재배를 위해서는 특정 고려 사항을 명심해야합니다..
일부 곰팡이는 곰팡이와 같은 실온에서 더 잘 발달되며 일부는 37 ℃에서 성공적으로 발달합니다. 일부 효모처럼 다른 것들은 두 온도 (두자 성 진균)에서 발달 할 수 있습니다..
이런 이유 때문에 때때로 한 시료를 실온에서 배양하고 37 ℃에서 다른 시료를 부화시키기 위해 두 번 심어주기 때문에 동일한 시료에 대해 여러 개의 Sabouraud 한천 플레이트를 사용해야합니다..
예를 들어, Sporothrix schenckii 그것은 두 개의 판으로 뿌려진다. 하나는 상온에서 배양하여 주형 단계를 얻고 다른 하나는 37 ℃에서 배양하여 효모 유사 상을 얻지 만, 후자에서는 5 %의 혈액을 배지에 첨가 할 필요가있다.
다른 경우에는, mycetomas의 샘플에서와 같이, Sabouraud 한천의 두 접시가 chloramphenicol과 다른 하나는 cycloheximide와 뿌렸다. 첫 번째는 곰팡이 기원의 진균종 (Eumicetoma)의 원인균과 방선균과 같은 박테리아 기원의 자궁 근종의 두 번째 원인균의 성장을 허용 할 것이다..
포자
Emmons에 의해 변형 된 덱 스트로스 사부 라우 한천은 2 그램의 덱 스트로스를 함유하고 있으며, 단리뿐만 아니라 곰팡이의 포자 및 보존을 위해 사용됩니다.
이 매개체에서 블래스트 마이 세스 데르 마티 티스.
보존
곰팡이 배양 물을 보존하려면 냉장고에 보관할 수 있습니다 (2-8 ° C). 보관 기간은 2 주에서 8 주까지 다양합니다. 이 시간이 지나면 과정을 반복하기 위해 하위 계승해야합니다..
일부 곰팡이는 실온에서 잘 유지됩니다. 표피 박테리아 foccosum, Trichophyton schoenleinnii, T. violaceum 및 Microsporum audounii.
덱 스트로스가 한천에서 완전히 제거되고 배지에서 한천의 양이 감소되어 건조가되지 않으면 변형 유지가 길어서 다형성을 피할 수 있습니다.
마이크로 문화
일부 사상 균류의 동정을 위해서는 Sabouraud 한천이나 성별 및 무성 생식의 구조를 관찰하는 특별한 수단을 사용하여 미시 문화를 수행 할 필요가있다.
인간 균종학
그것은 주로 곰팡이 질병, 특히 피부와 그 부착물 (머리와 손톱)에 영향을주는 질병의 진단에 사용됩니다..
샘플은 분비물, 삼출물, 피부, 머리카락, 손톱, 가래, CSF 또는 소변 일 수 있습니다. 일반적으로 분리 된 병원체는 피부병 및 피부 감염 및 전신 곰팡이 감염을 일으키는 균류입니다.
동물 균류학
동물은 종종 곰팡이 감염의 영향을 받기 때문에 Sabouraud 한천은 동물계에서만큼 유용합니다..
예를 들어, dermatophytes는 종종 동물에 영향을 미칠 수 있습니다. 그런 경우는 Microsporum canis var distortum, 고양이, 말, 돼지 및 원숭이에 자주 감염됩니다. 마찬가지로, Microsporum gypseum 개, 고양이, 소에 감염된다..
닭, 수탉 및 닭과 같은 새는 Microsporum gallinae.
다른 버섯처럼 자모 네마 퍼 시쿰, 그들은 동물, 주로 말, 노새, 당나귀에서 질병의 원인이되어 림프 혈관에서 중요한 염증을 일으킨다.
Sporothrix schenkii 및 Histoplasma capsulatum 국내 및 인간 동물에 영향을 미침.
환경 생태학
많은 병원성 또는 기회주의 균류는 특정 환경, 특히 수술실 및 클리닉 및 병원의 집중 치료 단위 (ICU)에서 특정 시간에 집중 될 수 있습니다. 그러므로, 그들을 제어 할 필요가있다..
다른 취약한 공간은 도서관 및 오래된 건물이며 환경 곰팡이의 농도에 영향을받을 수 있습니다.
환경 연구에서 Sabouraud 덱스 트로 오 한천은 곰팡이의 분리에 사용됩니다.
산업 균류학
Sabouraud 덱스 트로 오 한천은 화장품, 식품, 음료, 가죽, 섬유 등의 생산에서 곰팡이 오염 물질에 대한 연구에서 빠질 수 없습니다..
식물 균류학
식물은 또한 곰팡이에 의해 유발 된 질병을 앓고 식물의 다른 부분에 영향을 미치며 심지어 수확을 끝내고 농업에 큰 손실을 초래할 수 있습니다.
참고 문헌
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