몫:
한천 및 만니톨 기초, 준비 및 사용
그 소금 한천 및 만니톨 또는 소금기가있는 만니톨은 견고하고 선택적이며 차별적 인 배지입니다. 그것은 Chapman에 의해 병원성 그람 양성 구균의 분리를 위해 만들어졌으며, 특히 포도상 구균 (Staphylococcus aureus).
그러나, 표피 포도상 구균, 때로는 기회 주의적 병원균으로 존재할 수있는 포도상 구균 (Staphylococcus saprophyticus), 인식 된 비뇨기 병원체, 다른 종들 사이.
일부 Enterococcus는 그람 양성 포자 형성 균뿐만 아니라이 배지에서 자랄 수 있습니다..
이 매체는 임상 시료의 분석에 매우 유용하지만 식품의 미생물 연구 및 화장품, 의약품 등과 같은 산업 제품의 품질 관리에도 사용됩니다..
소금에 절인 만니톨 한천은 쇠고기, 트리 펩틴, 만니톨, 염화나트륨, 페놀 레드 및 한천의 추출물과 펩톤으로 구성됩니다.
색인
- 1 재단
- 2 준비
- 3 용도
- 4 품질 관리
- 5 최종 고려 사항
- 6 참고 문헌
재단
만니톨 한천은 높은 농도의 소금으로 선택적입니다. 염분은 억제 물질로 작용하여 그람 음성 박테리아의 성장을 방지합니다..
그것은 또한 만니톨 탄수화물과 페놀 레드 pH 지시약의 존재로 인해 차이입니다. 이것으로부터, 만니톨을 발효시킬 수있는 박테리아는 산을 생산하고, 배지를 산성화하고, 콜로니 및 중간 배지를 돌리게한다.
반면에, mannitol을 발효시키지 않는 식민지는 고기와 tripteína의 추출물과 펩타이드가 제공하는 영양분을 섭취하는 배지에서 자랍니다. 거기에서 박테리아는 그들의 성장에 필요한 탄소, 질소, 비타민 및 미네랄을 추출합니다..
이 경우 식민지는 약하거나 강할 수 있으며 매체는 같은 색을 유지하거나 자홍색으로 바뀝니다.
한천은 배지에 일관성을 제공하는 물질입니다.
준비
1 리터의 염장 된 만니톨 한천을 제조하기 위해, 우선 상업 상업소의 탈수 된 매체 111g을 칭량하고, 1000㎖의 증류수에 융점.
용해 공정을 개선하기 위해 매질을 자주 제거하여 열을가한다. 1 분 동안 끓게하십시오..
121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브에 피오 리아를 놓습니다.
시간이 끝나면 오토 라브에서 fiola를 꺼내어 서서히 방치하고 온도가 약 50 ~ 55 ° C 일 때 멸균 된 페트리 접시에 15 ~ 20 ml로 공급합니다.
그것을 고형화하고 반전 형태로 플라 퀘 로스 (plaqueros)로 주문하고 냉장고를 사용할 때까지 보관할 수 있습니다. 샘플을 심기 전에, 플레이트가 환경 온도를 견딜 때까지 기다려야합니다.
접시는 줄무늬에 의해 또는 drigalski 주걱으로 표면에 파종하여 뿌린다. 준비된 배지의 최종 pH는 7.4 ± 0.2이어야한다.
탈수 된 배지의 색깔은 연한 베이지 색이고 준비된 배지의 색깔은 오렌지색이다..
용도
높은 선택성으로 인해,이 매질은 식물의 존재를 찾길 원하는 혼합 식물상의 샘플을 심는 데 이상적입니다. 포도상 구균 (Staphylococcus aureus), 이 속의 주요 병원체로서.
이러한 의미에서, 가장 흔한 용도 중 하나는 인두 추출물과 비강 분비물의 미생물 분석, 특히 무증상 담체를 검출하는 것입니다. S. aureus.
일부 국가에서는이 분석을 식품 공급 업체로 일하기를 원하는 사람들을위한 필수 요구 사항으로 구현했습니다.
이 통제는 S. aureus, 따라서 거대한 식중독을 피할 수있다., staphylococcal enterotoxin으로 오염 된 식품의 섭취로 인해.
그것은 또한 상처 감염, 혈액 배양, CSF, 기관지 폐포 세척 등의 파종에 포함될 수 있습니다..
Salted mannitol 한천은 그람이 그람 양성 구균을 집단으로 발견 한 CLED 아가 또는 혈액 한천으로부터 소변 배양 물의 재조합에 유용하다.
또한 식품, 음용수, 토양 등의 미생물 분석에서도 유효합니다.
품질 관리
염장 된 만니톨 한천이 들어있는 플레이트를 준비하면 품질 관리를 수행하는 것이 좋습니다. 성장이 있든 없든 대조군 균주를 뿌린다..
양성 대조군으로서, 포도상 구균 (Staphylococcus aureus). 황색 군체를 개발함으로써 만족스럽게 성장해야하며, 배지도 같은 색깔이됩니다.
마찬가지로, 알려진 균주를 포함시키는 것이 편리하다. 표피 포도상 구균. 핑크색 식민지를 개발하면 만족스럽게 성장해야하며, 배지는 더 강한 핑크색.
음성 대조군으로이 배지에서 자라서는 안되는 균주가 사용됩니다. 예를 들어, 알려진 균주를 심을 수 있습니다. Escherichia coli 또는 Klebsiella pneumoniae. 예상 된 결과는 완전한 억제, 즉 성장 없음을 의미합니다..
또한 접종하지 않은 판을 배양해야합니다. 거기에는 성장이없고 색이 바뀌지 않아야합니다..
오염, 탈수, 변색 등과 같은 악화 징후가있는 경우 플레이트를 사용하지 않는 것이 중요합니다..
최종 고려 사항
염장 된 만니톨 한천 배지를 사용할 때 몇 가지 중요한 측면을 고려해야합니다.
-노란색 식민지의 성장을 얻는 것이 그것이 포도상 구균 (Staphylococcus aureus). Enterococcus의 일부 균주는 특정 그람 양성 포자 형성 세균뿐만 아니라이 배지 및 발효 만니톨에서 자랄 수 있음을 기억해야합니다..
그러므로 식민지에 그램을 넣고 카탈라아제 검사를하는 것이 중요합니다.
-다른 한편, 다른 종의 포도상 구균 (Staphylococcus)과 포도상 구균 그들은 또한 만니톨을 발효시킬 수 있습니다. 그러므로 콜로니를 영양가있는 배지로 옮겨서 응고 물 시험을 수행하는 것이 중요합니다.
사람 발효 만니톨에 대한 임상 적 중요성이있는 포도상 구균 (Staphylococcus) S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, 다른 사람들과.
다른 것은 가변적 인 반응을 나타낼 수 있습니다. 때로는 긍정적이고 때로는 부정적입니다. 일부는 S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, 다른 사람들과.
-배지의 높은 염 농도가 결과를 방해 할 수 있기 때문에 managitol agar에서 직접 콜로니를 취하여 응고 효소 테스트를 수행하는 것은 바람직하지 않습니다.
-마지막으로 염장 된 만니톨로 씨를 뿌린 플레이트를 48 시간 동안 배양하는 것이 좋습니다. S. aureus 잦은 발병은 아니지만 천천히 발효시킬 수 있습니다.
참고 문헌
- 영국 실험실. 만니톨 짠 한천. 구매 가능 : britanialab.com
- "소금에 절인 만니톨 한천". 위키 백과, 무료 백과 사전. 2018 년 10 월 31 일, 19:08 UTC. Jan 17 2019, 20:55, 이용 가능 : en.wikipedia.org.
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- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott의 미생물 학적 진단. 12 ed. 아르헨티나 Panamericana S.A 사설
- BD 실험실 BD 만니톨 소금 한천. 2013 년에 이용할 수 있습니다. bd.com.