몫:
영양 한천 기초, 준비 및 사용
그 영양가 한천 그것은 비 선택적이고 비 차별적 인 고체 배양 배지이다. 이 환경에서 영양 관점에서 요구하지 않는 모든 종류의 박테리아를 키우십시오..
그것은 단순한 수단이며, 그 이름에도 불구하고 뇌 심장 주입 한천이나 트립 티카 아제 콩 한천과 같은 다른 유사한 매체에 비해 영양 가치가 낮습니다.
실험실에서의 유용성은 매우 다양합니다. 주로 종의 계대 (subculture), 계통 유지, 식민지 계산, 혈액 한천 준비의 기초로 사용됨..
마찬가지로, 밝은 베이지 색상으로 인해, 일부 박테리아 균주에 의해 생성 된 안료의 생산은 Pseudomonas aeruginosa, 에 의해 생성 된 벽돌 적색 안료 세라 티아 마르 세 센스 실온에서, 포도상 구균 (Staphylococcus aureus), 다른 사람들과.
또한 시장에서 가장 경제적으로 성장하는 미디어 중 하나입니다..
색인
- 1 재단
- 2 구성
- 3 준비
- 4 용도
- 4.1 혈액 한천의 준비를위한 기초로서
- 4.2 포자 형성 세균의 포자를 자극
- 4.3 긴장 유지
- 4.4 콜로니 계수
- 4.5 진단 테스트 실행
- 4.6 중온 성 호기성 레크리에이션 식염수 (해변)의 회수
- 5 참고
재단
이미 언급했듯이, 제한없이 복잡한 해석없이 세균 증식을위한 영양 물질을 제공하는 것에 기반한 매우 간단한 방법입니다.
배지가 반투명하기 때문에 깊이에 따라 파종하는 방법으로 집락 수를 세는 데 이상적입니다.
구성
그것은 주로 고기 추출물 또는 효모 추출물, 펩톤 또는 췌장 젤라틴 소화액, 한천, 염화나트륨 및 증류수로 구성됩니다.
고기 나 효모 및 펩톤의 추출물은 탄소와 필수 미네랄 (질소, 인, 황)의 원천을 나타내며 박테리아가 에너지 원 및 성장 인자로 사용할 것입니다.
마찬가지로, 한천은 모든 고체 성장 미디어의 기초이며, 로버트 코흐 (Robert Koch)가 미디어 일관성을 유지하기 위해 사용한 최초의 기본 화합물 인 젤라틴을 대체합니다..
한천은 갈락토스, 갈 락토 만난, 아가로 오스 및 아가로 펙틴으로 구성된 다당류입니다. 40 ° C로 설정되고 100 ° C에 가까운 온도로 녹습니다..
염화나트륨은 박테리아 발생에 필요한 삼투압을 매체에 제공합니다.
마지막으로, 물은 동결 건조 된 화합물을 수화 및 용해시키는 역할을한다. 중성 pH로 조정 된 증류수를 사용해야한다. 수돗물에는 배지에서 인산염과 반응하여 불용성 염을 형성 할 수있는 칼슘과 마그네슘이 포함되어 있기 때문에 사용해서는 안됩니다.
준비
1 리터의 영양 한천의 경우 탈수 된 배지 31g을 계량해야한다. 그것은 fiola에 배치하고 1 리터의 증류수에 용해. 5 분간 휴식 한 후 열원을 가열하고 1 ~ 2 분 동안 끓을 때까지 계속 섞으십시오.
그런 다음 오토 클레이브에 fiola를 넣고 121 ° C에서 20 분 동안 살균하십시오.
시간이 끝나면 오토 클레이브에서 꺼내어 층류 후드 또는 분젠 버너를 사용하여 멸균 페트리 접시에서 제공합니다..
배양 접시가 일회용 (플라스틱) 인 경우 한천이 약 50 ° C의 온도에있을 때 배양하여 과도한 열에 의해 변형되지 않도록해야합니다.
고형화 및 플레이트 홀더에 보관하여 사용하기 전까지 2-8 ° C에서 냉장 보관.
접시는 반드시 뿌려야합니다. 한천 배지는 오염되거나 탈수 된 경우에는 사용하지 않아야합니다..
준비된 배지의 pH는 7.3 ± 0.2.
용도
미생물학 실험실에서 사용되는 가장 간단한 배지입니다. 그 배합은 까다로운 박테리아의 성장에 탁월합니다..
주요 용도는 다음과 같습니다.
혈액 한천의 준비를위한 기초로서
이 배지는 때로는 한천을 준비하기위한 기초로 사용되지만, 가장 일반적으로 사용되는 것은 아닙니다.
포자 형성 세균의 포자를 자극
이 배지는 특히 포자 형성 박테리아의 포자를 자극하는데 유용하다. 바실러스 속.
이렇게하기 위해 속의 균주를 뿌린다. 바실러스 aerobiosis에서 37 ℃에서 24 시간 동안 배양 하였다. 일단 식민지가 자라면, 플레이트는 온도에 의한 스트레스를받습니다. 즉, 스토브의 온도는 44 ° C로 증가하고 24 시간 이상 방치되거나 냉장고에 24 시간 동안 도입됩니다.
작물이 끝날 때 그람 음성은 그램 염색 또는 Shaeffer-Fulton 포자 얼룩으로 확장되고 염색됩니다. 그 안에는 내생 포자 (바실러스 내부 포자)와 외래 포자 (바실러스 외부 포자)가있는 바실러스가 관찰됩니다..
변형 유지 보수
일부 연구 기관이나 대학 교육 지원 실험실은 박테리아 은행 (bacteriotheca)을 연구 업무 또는 교육 관행 준비에 사용하기 위해 임상 적으로 중요한 박테리아를 가능한 오랫동안 유지해야합니다. 학생들은 이러한 미생물을 조작하고 식별하는 법을 배웁니다..
두뇌 심장 주입 한천뿐만 아니라 영양 한천,이 목적으로 사용할 수 있습니다. 한천을 준비하고 베이클라이트 캡 튜브에 붓고 한천이 바닥에 블록을 형성하고 표면의 경사 (플루트 피크)를 형성하는 방식으로 바닥에 기울입니다..
각 튜브에는 심을 박테리아의 이름과 날짜를 넣으십시오. 베젤에 각 박테리아를 심고 24 시간 동안 배양 한 다음, 식민지를 재배하면 튜브를 실온에서 보관합니다.
세균 감염은 배지의 오염과 탈수 및 박테리아의 죽음을 피하기 위해 1 개월에서 3 개월까지 갱신해야합니다.
이런 방식으로 요구되지 않는 박테리아 만 유지할 수 있습니다..
식민지 세기
표준 계수 한천과 같은 식민지 계산을위한 특별한 방법이 있지만 영양가있는 한천은 표면에 drigalski 주걱으로 파종하거나 깊이에 의해 사용할 수 있습니다. 따라서 식품 및 물의 미생물 분석에 매우 유용합니다..
진단 테스트 실행
그것은 혈액이나 다른 첨가물을 함유하지 않는 배지이기 때문에이 배지에서 성장한 콜로니를 취하여 카탈라아제 시험을 수행하는 것이 이상적입니다.
마찬가지로, 그것의 명확한 색깔 때문에, 방해없이 씨를 뿌린 한천의 지역에 직접적으로 oxidase 검사를하는 표시된다.
중온 성 호기성 레크리에이션 식염수 (해변) 복구
10 % 해수로 제조 한 영양 한천은 해변 수역에서의 중온 성 에어로 우의 평가에 유용합니다.
이러한 방식으로, 우리는 이러한 미생물과 함께 물이 가지고있는 실제 오염의 수준을 알 수 있습니다. 왜냐하면 이러한 유형의 시료에서 일반적인 방식으로 준비된 배양 배지를 사용할 때 결과가 중첩되기 때문입니다.
이것은 Cortez et al. 2013 년 연구 논문.
이것은 과염소 환경에서 저염 환경으로 이동할 때 박테리아가 겪는 급격한 변화 때문에 설명 할 수 있습니다. 따라서 미생물은 생존 가능하지만 경작이 불가능한 혼수 상태에 들어갑니다.
참고 문헌
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