몫:
Agar Hektoen 기초, 준비 및 사용
그 헤 코엔 한천 또는 장의 Hektoen 한천은 견고하고 선택적이며 차별적 인 배지입니다. 그것은 Shigella 및 Salmonella 속의 장내 병원성 박테리아를 격리하기 위해 King and Metzger가 만든 Hektoen 연구소에서 창안되었습니다..
배지 proteose 펩톤, 효모 추출물, 담즙 염, 유당, 자당, 살리신, 티오 황산나트륨, 염화나트륨, 구연산 철 암모늄, 시트르산, 브로 모티 몰 블루, 산 푹신 한천 구성된다. 이 배합물은이 배지에서 자랄 수있는 박테리아의 나머지에서 속균 및 살모넬라 균을 구별 할 수있게한다.
헤 코엔 한천과 동일한 기능을하는 다른 방법이 있지만, 다른 방법과 비교하여 더 큰 이점을 제공합니다. 특히 시겔 라 종.
두 종의 종은 오염 된 음식의 섭취로 인하여 사람에게 심각한 위장 문제를 일으킨다. 따라서 전송은 대변으로 이루어집니다. 그래서 헤 코엔 한천의 사용은 주로 대변 및 식품 샘플의 미생물 분석에 명시되어 있습니다..
색인
- 1 재단
- 2 준비
- 3 사용
- 4 품질 관리
- 5 제한 사항
- 6 참고 문헌
재단
헤 코엔 한천은 펩톤과 효모 추출물을 영양소의 원천으로 함유하고있어 미생물 발달에 필수적인 요소를 제공합니다.
그러나 일부 박테리아, 특히 그람 양성균과 그람 음성균의 성장을 억제하여 작용하는 담즙산 염도 있습니다. 이런 이유로 그것은 선택적인 매체로 간주됩니다.
반면에, 헤 코엔 한천은 미분 매체입니다. 이 성질은 lactose, saccharora, salicin 같은 발효 성 탄수화물이 bromothymol blue와 acid fuchsin으로 대표되는 pH 지시계와 함께 존재 함으로서 부여됩니다..
프로 테우스를 제외하고 연어 또는 오렌지을 개발 속의 살모넬라와 시겔 식민지에 속하지 않는이 매체에서 성장 할 수있는 모든 박테리아. 이것은 존재하는 탄수화물 중 하나 또는 여러 가지의 발효 때문이며, 이는 매체를 산성화시켜 pH 지시약이 켜지도록합니다.
한편, Shigella 속 살모넬라 매체 알칼리성이므로 그 콜로니 녹색 - 청색있는 에너지 원으로 만 펩톤을 사용하여, 존재하는 임의의 탄수화물을 발효없는.
또한이 매질에서 황화수소 (무색의 기체)를 생성 할 수있는 박테리아를 식별 할 수 있습니다. 티오 황산나트륨은 황의 원천으로 작용하고 철 구연산염은 노출시키는 물질입니다. 두 화합물 모두 반응을 나타내는 황화철의 흑색 침전물을 형성 할 수있다..
주위에 투명한 후광이있는 식민지의 중심에 검은 색 침전물이 생선 모양을 나타냅니다. 이 특성은 살모넬라 속 (Salmonella)의 존재를 시사한다..
마지막으로, 염화 나트륨은 삼투압 균형을 유지하고 한천은 배지에 견고한 일관성을 부여합니다.
준비
탈수 된 배지 76g을 달아 증류수 1L에 녹인다. 혼합물을 격렬하게 흔들어 섞은 다음 10-15 분 동안 휴식을 취하십시오. 그것은 가열되고 끓여서 전체 용해까지 회전 운동을합니다. 이 매체는 고압 증기 멸균되지 않았습니다..
배지가 약 45 ℃의 온도에 도달하면 20ml의 부피를 멸균 배양 접시에 직접 부어 넣는다..
한천은 고형화가 허용됩니다. 그 당시 그들은 사용할 준비가되었습니다. 즉시 사용하는 것이 좋습니다. 가능하지 않으면 냉장고에 넣어 보관해야합니다..
접시는 냉장고에서 일찍 꺼내 놓아야 실내 온도를 유지할 수 있습니다.
배지의 pH는 7.5 ± 0.2이어야한다. 탈수 된 배지의 색깔은 자주색이며 준비된 갈색은 녹색이다..
사용
헤코 엔 한천의 사용은 대변 및 식품 표본에서 속균 (Shigella)과 살모넬라 (Salmonella) 속에 속하는 박테리아를 찾는 데 권장됩니다..
이러한 박테리아를 분리하는 기능 등 사용자가 이전 셀렌, 셀렌 시스테인 브로스, 테트라 티오 네이트 육수 실질적 농축 증가와 같은 특수 브로스에서 샘플.
접종원은 강해야하며 파종은 줄무늬로 수행됩니다. 플레이트를 37 ℃에서 24 시간에서 48 시간 동안 균류 배양합니다.
식민지의 특성이 현재 그들의 해석과 차별화를 위해 더 명확하기 때문에 48 시간 동안 인큐베이션이 권장됩니다.
품질 관리
이 배지에서 품질 관리를 수행하기 위해 다음과 같은 인증 된 박테리아 균주가 사용됩니다. 살모넬라 티피 무리 움 ATCC 14028, 살모넬라 장염 균 ATCC 13076, 이염 플렉 스 네리 ATCC 12022 및 소아용 소아 즙 ATCC 25931.
예상되는 결과는 다음과 같습니다. 살모넬라 티피 머륨 및 살모넬라 장염 균 흑인 중심이 있거나없는 녹색 - 푸른 색 식민지를 개발해야합니다. 시겔 라 (Shigella) 종은 청록색 콜로니로 자라는 반면.
당신은 또한 대장균 ATCC 29212, 프로 테우스 미라 빌리스, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 및 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ATCC 25923.
이 경우 관찰 된 특성은 다음과 같습니다. 대장균 및 K. pneumoniae 이 배지에서 그들은 주위에 같은 색깔의 침전물이있는 연어에서 오렌지로 변하는 식민지를 개발할 것입니다. 한편, Proteus는 검은 색 중심이 있거나없는 청녹색 식민지를 개발할 것입니다..
동안 S. aureus 및 E. faecalis 때때로 금지되어야한다. E. faecalis 노란 식민지로 자라며 아주 작다..
반면에이 매질은 오토 클레이브에서 멸균되지 않기 때문에 매질의 무균 성을 평가하는 것이 중요합니다. 그러므로, 준비된 각 배치는 37 ℃에서 24 시간 동안 공기 방울로 접종하지 않고 1 ~ 2 개의 평판 배양해야한다.
분명히 판에 어떤 종류의 성장도 없을 것으로 예상됩니다..
제한 사항
-프로 테우스 (Proteus) 종은이 환경에서 자랄 수 있으며, 식민지의 특성은 살모넬라 균 또는 시겔 라 (Shigella) 종과 혼동 될 수 있습니다. 이런 이유로 의심스러운 식민지는 생화학 검사로 확인해야합니다..
-검색 미생물은 낮은 농도에있는 경우이 매체에 확장되지 않아서, 덜 선택적 한천이 방법의 사용을 동반하는 것이 필요하다.
-과도한 열로 인해 매체의 구성이 바뀌므로 준비 중 과열되지 마십시오..
-비정상적으로 유당 발효하는 살모넬라 균이 눈에 띄지 않게 보일 수 있습니다..
참고 문헌
- 위키 피 디아 공헌자. 헤 코엔 한천. 위키 백과, 무료 백과 사전. 2019 년 3 월 13 일 23시 38 분 UTC. 다운로드 위치 : .wikipedia.org / Accessed March 19, 2019.
- BD 실험실 BD Hektoen Enteric Agar (HE 한천). 2013 년에 이용할 수 있습니다. bd.com
- 영국 실험실. Hektoen Enteric Agar. 구매 가능 : britanialab.com
- Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. 한천 Hektoen 한천입니다. 구입처 : f-soria.es
- Difco & BBL 매뉴얼, Hektoen Enteric Agar. 2 판. 구매 가능 지역 : bd.com/europe