몫:
Agar Endo 기초, 준비 및 사용
그 엔도 한천 또는 Endo는 어느 정도의 선택성을 가진 견고한 차동 배지입니다. 1904 년 Endo는 유당 발효 박테리아를 비 발효 박테리아와 구별하기 위해 원래의 포뮬라를 만들었습니다. 처음에는 그것이 격리를 위해 설계되었습니다. 살모넬라 티피, 그러나 나중에 매체의 목적은 대장균 군에 대한 조사로 바뀌었다..
엔도 (Endo) 한천의 원리는 유지되었지만 그 배합은 수년 동안 무수한 변화를 겪어 왔습니다. 현재, 배지는 펩타이드 소화 동물 조직, 유당, 인산 수소 칼륨, 아 황산나트륨, 염기성 푹신 및 한천으로 구성되어있다.
매체의 주된 사용은 주변 그람 엔테로 박테리아 세 (Enterobacteriaceae)과에 속하는 음성 박테리아 및 다른 가정의 분리 및 분화에 링크 된.
긴 물 샘플, 식품, 유제품의 대장균의 검출에 사용되었지만, 지금 매체 다른 유사한 기능을 사용하여 이동. 그러나, 일부 미생물학 실험실은이 한천을 사용하여 임상 적 기원의 샘플에서 Enterobacteriaceae를 분리합니다.
색인
- 1 재단
- 2 준비
- 2.1 엔도 한천
- 2.2 한천 m-Endo의 변이 형
- 3 사용
- 4 품질 관리
- 5 제한 사항
- 6 참고 문헌
재단
엔도 한천 부담스럽지 미생물의 성장에 필요한 아미노산, 질소, 탄소 및 에너지 원으로서 펩톤 포함.
반면에, 한천의 약간 선택적 특성은 아황산 나트륨과 염기성 푹신을 첨가함으로써 제공되며; 두 성분 모두 대부분의 그람 양성균의 발달을 부분적으로 또는 완전히 억제한다.
차동 특성이 경우에도 pH를 표시기로서 기능 락토스 염기성 푹신 인 발효 탄수화물의 존재에 의해 주어진다.
이 한천에서 자라며 유당을 발효시킬 수있는 그람 음성 박테리아는 강한 분홍색 콜로니를 형성합니다. 병적 인 대장균 무지개 빛깔의 녹색 금속 광택이있는 진한 빨강 식민지의 형성. 이것은 탄수화물의 발효에서 산이 많이 생성되기 때문입니다.
식민지 주위에있는 배지도 강한 핑크색으로 변한다는 것을 알아야한다. 유당의 비 발효 그람 음성 간균은 중간 또는 무색과 유사한 연한 분홍색의 콜로니를 형성하지만.
인산 수소 칼륨은 매질의 pH와 균형을 이루며, 한천은 견고한 일관성을 제공하는 성분입니다.
준비
엔도 한천
건조한 배지 41.5g을 계량하여 증류수 1L에 녹인다. 매질이 완전히 용해 될 때까지 자주 교반하여 혼합물을 가열하십시오. 121 ° C, 15 lb 압력에서 15 분 동안 오토 클레이브에서 소독하십시오..
오토 클레이브에서 제거 할 경우, 서빙 전에 균일화 교반, 45-50 ℃의 온도로 냉각시켰다. 멸균 배양 접시에 20ml 붓는다..
냉장고에 보관하기 전에 판을 굳히거나, 뒤집어서 상자에 보관하거나, 어두운 종이로 포장하십시오. 직접 빛으로부터 준비된 매체를 보호하는 것은 매우 중요합니다. 권장되는 방법은 필요한 양을 준비하는 것입니다..
냉장고에 보관하는 경우, 사용하기 전에 접시를 부드럽게해야합니다.
배지의 pH는 7.2 ~ 7.6이어야하고 준비된 배지의 색은 옅은 분홍색이다..
변형 한천 m-Endo
맥카티, 레이니 및 Grasso는 다음의 화학식 엔도 한천 (m 엔도) 이상의 화합물을 함유하는 또 다른 버전은 제제의 형태 변화.
이러한 변형은 포함 락토스 트립 토스, 동물 조직, 나트륨, 칼륨, 인산 나트륨, 아 황산나트륨, 효모 추출물, 1 인산 칼륨, 염기성 푹신, 소듐 데 옥시 콜레이트, 염화 라 우릴 황산 분해 효소 카제인 분해 효소 나트륨과 한천.
이 경우 탈수 된 배지 51g을 달아 에탄올 20ml를 포함하는 증류수 1L에 현탁한다.
배지가 완전히 녹을 때까지 약간 가열한다. 오토 클레이브에서 과열 및 멸균하지 마십시오. 혼합물이 균일하면, 멸균 배양 접시에 담아 응고시킨다..
사용
일부 국가에서는 물과 식품 표본에서 총 대장균 군과 대변 군 군의 계수에 여전히 사용되며, 특히 대장균 배설물 오염의 주요 지표로.
M-엔도 한천은 모니터링 및 제어 프로그램 소독 및 폐수 처리에 대한 미국 공중 보건 협회 (APHA)에 의해뿐만 아니라 식수의 품질을 평가하는 것이 좋습니다.
가장 많이 사용되는 방법은 Lauryl sulphate broth로 2 ~ 4 시간 동안 시료를 농축 한 후 막 여과입니다.
또한 존재를 확증하기 위해 특별히 완전한 위상 확증에서 가장 가능성 수 기법 (NMP) 음식과 물 미생물 분석 EMB 한천 대용으로 사용될 수있다 대장균 탁한 EC broths에서.
품질 관리
준비된 엔도 한천 배지의 품질을 평가하기 위해 알려진 또는 인증 된 대조 균주를 사육한다.
이 목적을 위해 사용할 수있는 균주는 다음과 같습니다. 대장균 ATCC 25922, 대장균 ATCC 11775, 엔테로 박터 클로 아카에 ATCC 13047, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, 살모넬라 티피 무리 움 ATCC 14028, 이염 플렉 스 네리 ATCC 12022, 프로 테우스 미라 빌리스 ATCC 14153 및 Enterococcus faecalis ATCC 11700.
균주를 고갈시켜 파종하고 37 ℃에서 24 시간 동안 항생제 배양.
예상되는 결과는 다음과 같습니다.
- ~까지 대장균 : 식민지 강한 붉은 색, 금속 광택.
- ~까지 E. cloacae 및 K. pneumoniae 식민지는 분홍색 점액이어야한다..
- S의 경우. 티피 머륨, S. flexneri 및 P. mirabilis 식민지는 보통 옅은 분홍색 또는 무색이다..
- 마침내, E. faecalis 부분적으로 저해 될 것으로 예상되므로, 강한 핑크색의 매우 작은 콜로니에서 그 성장이 좋지 않아야한다.
제한 사항
-선택적 전력 하에서 엔도 매체들은 일부 그람에게 예컨대 포도 구균, 엔테로 심지어 효모 등 양성균 성장할 수 있다는 것이 가능하다.
-Enterobacteriaceae 계통에 속하지 않는 다른 세균은 예를 들어이 배지에서 발생 될 수있다. 슈도모나스 sp 및 Aeromonas sp. 이 균주의 특징은 무색의 불규칙한 콜로니이다.
-제조이 광 매체에 매우 민감하기 때문에, 이것에 장기간 노출은 비가 역적으로 손상 매체, 인디케이터 시스템을 저하.
-배지의 성분은 발암 성으로 간주되므로 직접 접촉을 피해야합니다.
-탈수 된 매질은 흡습성이 매우 강하며 실내 온도, 밀폐 된 상태 및 건조한 환경에서 원래 용기에 보관해야합니다.
참고 문헌
- BD 실험실 엔도 한천. 2013 년에 이용할 수 있습니다. bd.com
- Neogen Laboratories M 엔도 한천. 구매 가능 : foodsafety.neogen.com
- "한천 엔도." 위키 백과, 무료 백과 사전. 2019 년 9 월 7 일, 08:27 UTC. Feb 28, 2019, 22:55. 구매 가능 지역 : en.wikipedia.
- MercK 실험실. 엔도 한천 2019. 이용 가능 : merckmillipore.com
- 실험실 기술 시트. M -Endo Agar LES. 구매 가능 지역 : liofilchem.net