Agar CLED 기초, 사용 및 준비



그 CLED 한천 (Cystine-Lactose-Electrolytes-Deficient)는 미분 적 고체 배양 배지이며 요로 감염의 진단에 사용됩니다. 배지의 조성은 요로 병원균의 성장을 위해 고안되었으며 식민지 형성 단위 (colony forming unit, CFU)의 정량화에 이상적입니다..

그람 음성균과 그람 양성균이 자랄 수 있기 때문에 CLED 배지는 비 선택적이다. 그러나 대부분의 요로 감염은 단일 유형의 미생물에 의해 발생하기 때문에 이것은 문제가되지 않습니다..

다균 감염의 경우 2 또는 3 개의 다른 박테리아를 얻을 수 있지만 매우 드물며 대부분 오염 된 샘플입니다.

이 배지에서 자랄 수있는 그람 양성균 중에는 가족에 속한 세균이있다 장내 세균과 및 다른 장내 세균으로, 우레아 샘플에서 가장 자주 분리되는 우레아 제제는 다음과 같습니다 : Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, 모르가 넬라 모르 가니, Pseudomonas aeruginosa, 다른 사람들과.

마찬가지로,이 배지에서 자랄 수있는 그람 양성균 중에는 황색 포도상 구균 (Staphylococcus aureus), 스타 필로 saprophyticus, 엔테로 코커스 패 칼리스, 스트렙토 agalactiae, 코리 네 박테 리움 (Corynebacterium) 속, 락토 SP 그리고 그들은 복잡한 것처럼 효모를 키울 수 있습니다. 칸디다 알비 칸스.

그러나, 배지의 화학적 조성으로 인해, 일부 비뇨 생식기 병원균의 성장을 허용하지 않는다. Neisseria gonorrhoeae, 가르 데 렐라 질, 다른 사람들과.

색인

  • 1 CLED 한천의 기초
  • 2 CLED 아가 (Bevis)의 기초
  • 3 용도
    • 3.1 소변 채취
    • 3.2 해석
    • 3.3 식별
  • 4 준비
  • 5 참고

CLED 한천의 기초

CLED 배지는 에너지 원으로 육류 추출물, 카제인 췌장 가수 분해물 및 젤라틴 가수 분해물을 가지고 있습니다. 그들은 필요없는 박테리아의 개발을위한 영양소를 제공합니다..

또한 시스틴은 대장균 군의 성장을 허용하는 아미노산으로 작은 크기로 구분할 수 있습니다.

마찬가지로, 락토오스는 발효 성 탄수화물을 함유하고 있는데, 이러한 이유로이 미디엄은 미분이다. 발효 박테리아와 비 발효 유당을 구별 할 수있다..

비 발효 박테리아 따라서, 녹색 원래 한천의 색상을 고려하여 환경의 변화를 생성하지 않는 동안 발효 박테리아, 황색 식민지 개발을위한 산 생산의 pH을 설정.

발효 반응은 pH 지시약의 존재로 인해 밝혀졌습니다.이 지시약은 브로 모 티몰 블루.

반면에, 배지의 전해질 농도가 낮 으면 전형적으로 속의 침습적 인 성장을 억제한다 프로 테우스, 득실 대 효과. 이것은 Proteus 속이 존재 하는지를 포함하여 UFC의 세기를 허용하기 때문에 다른 수단과 관련하여 이점을 창출합니다.

그러나 전해질의 농도가 낮 으면 일부 종의 성장을 억제합니다 시겔 라, 다른 수단과 관련하여 이것이 단점이된다..

CLED 한천 (Bevis)

원래의 푹신 산 성분 (Andrade 지시약)을 원래의 성분에 첨가 한 Bevis가 만든이 배지의 변형 또는 변형이 있습니다. 브로 모 티몰 블루와 함께 발효를 비 발효 박테리아와 구별합니다..

재래식 배지와 변형 배지의 차이는 식민지가 채택한 색입니다. nonfermenters은 푸른 빛이 도는 회색 동안 유당은 박테리아를 발효의 경우, 식민지, 분홍색 또는 빨간색 후광 붉은 오렌지 개발.

용도

CLED 한천은 소변 표본 채취에만 사용됩니다. 이 매체의 사용은 특히 유럽 연구소에서 빈번히 발생하지만 미국에서는 사용 빈도가 낮습니다.

샘플 수집은 다음을 포함하여 신뢰할 수있는 결과를 얻기 위해 특정 매개 변수를 충족해야합니다.

  • 샘플을 채취하기 전에 항생제를 복용하지 마십시오..
  • 바람직하게는 침착성 방법으로 표본을 채취 할 수 없을 때 아침 집중 시간이 길기 때문에 아침의 첫 시간부터 소변을 가져옵니다..
  • 샘플을 채취하기 전에 성기를 철저히 씻으십시오..
  • 첫 번째 배뇨 스트림을 버린 다음 컨테이너를 배치하십시오..
  • 살균 표지 된 용기에서 소변 25 ~ 30 ml 수집.
  • 얼음에 둘러싸인 실험실에 즉시 가져 가라..
  • 배출 2 시간 전에 처리하거나 4 ℃에서 24 시간 동안 냉장 보관해야합니다.

파종 소변 샘플

소변 샘플은 1:50으로 희석해야합니다..

희석시 환자의 소변 0.5ml를 넣고 24.5ml의 멸균 생리 용액으로 희석한다..

희석 된 소변 0.1 ml를 측정하고 CLED 배지에 drigalski 주걱으로 표면에 뿌린다. 식민지 계산을 위해 표시된 시딩 방법입니다. 그것이 결과가 CFU / ml로 표시되어야하기 때문에 소변 샘플에 사용되는 이유입니다.

콜로니 수를 계산하고 (10)에 의해 승산하고이 50 CFU / ㎖ 소변의 개수를 획득하고 이러한 콜로니의 정량화는 다음과 같이 진행.

통역

100,000 CFU / ml 이상으로 계산 - 인도 비뇨기 감염

1000 CFU / ml 이하로 계산 - 감염 없음

1000-10,000 CFU / ml 사이에서 계산 - 의심스러운, 가능한 오염, 샘플 채취 반복.

신분증

CLED 한천에서 자란 콜로니는 그람을 만들어야하고 미생물의 변이 형질 특성에 따라 특정 계대 배양이 수행됩니다.

예를 들어 그람 음성균 인 경우 MacConkey 한천에 뿌려서 유당 발효 여부를 확인할 수 있습니다. 또한 영양가 한천을 첨가하여 산화 효소 검사를 시행합니다.

그람이 그램 양성 구균을 밝혀 내면 짠맛이 강한 만니톨 한천과 영양 한천에서 계대 배양 할 수 있습니다. 후자에서는, 카탈라아제 시험이 수행된다. 마지막으로, 효모가 관찰되면, 그것은 Sabouraud 한천에 뿌려집니다.

많은 실험실에서 CLED 배지의 사용을 피하고 소변 샘플을 뿌리기 위해 혈액 한천, MacConkey 및 영양 한천을 사용하는 것을 선호합니다.

준비

1 리터의 증류수가 든 유리 병에 36.2g gr의 분말 CLED 한천을 녹입니다. 휴식 5 분 후, resuspended 한천을 따뜻하게, 1 분 동안 끓을 때까지 지속적으로 혼합.

그런 다음 오토 클레이브에서 121 ° C에서 15 분 동안 멸균하십시오. 일단 시간이 끝나면 오토 클레이브에서 꺼내어 45 ℃의 온도에 도달 할 때까지 식힌다. 이어서 각 멸균 배양 접시에서 15 - 20 ml 사이에서 제공.

판을 제공하는 절차는 오염을 방지하기 위해 층류 후드 내부 또는 분젠 버너 앞에서 수행해야합니다.

서빙 된 판은 고형화가 가능하고, 판 홀더에서 뒤집어서 주문할 때까지 냉장고 (2-8 ° C)에 보관하십시오.

준비된 배지의 최종 pH는 7.3 ± 0.2이어야한다..

참고 문헌

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  3. 영국 실험실. 하프 CLED. 구매 가능 : britanialab.com.
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