베어드 파커 한천 기초, 준비 ​​및 사용



그 베어드 파커 한천 그것은 견고하고 선택적이며 차별적 인 배양 배지입니다. 그것은 검출 및 응고 인자 양성 포도상 구균 계수를 위해 1962 년에 창안되었습니다 (포도상 구균 (Staphylococcus aureus)).

그것은 췌장 카제인 가수 분해물, 고기 추출물, 효모 추출물, 염화 리튬, 글리신, 피루브산 나트륨, 칼륨 텔루, 한천 및 난황 에멀젼을 포함.

베어드 파커 한천은 S. aureus 텔루 라이트를 감소시키고 레시틴 분해 효소를 생산하는 것. 두 속성 모두이 종에 대한 특정 특성을 가진 서식지를 생성합니다. 따라서,이 미생물의 검출에 큰 효과를 발휘합니다.

전형적인 식민지 S. aureus 그들은 검은 색이거나 어두운 회색이며 무색 테두리와 그 주위를 감싸는 명확한 후광이 있으며 나머지 미생물과는 차별화됩니다. 이 병원균은 임상 표본, 물, 화장품 및 생우 또는 조리 된 식품에서 발견 할 수 있습니다.

식중독, 갑상선 증후군, 독성 쇼크 증후군, 농양, 수막염, 패혈증, 심내막염과 같은 다양한 병리학 적 증상 때문에 진단이나 검출이 매우 중요합니다..

색인

  • 1 재단
    • 1.1 영양력
    • 1.2 선택적
    • 1.3 차동
  • 2 준비
    • 2.1 계란 노른자 유제
    • 2.2 1 % w / v의 칼륨 텔루 라이트
    • 2.3 배양액의 준비
  • 3 사용
    • 3.1 임상 견본
    • 3.2 음식 견본
    • 3.3 물 샘플
  • 4 품질 관리
  • 5 권장 사항
  • 6 참고 문헌

재단

영양소

카제인 췌장 가수 분해물, 육류 추출물 및 효모 추출물은 일반적인 미생물 발달에 필요한 영양소, 비타민 및 미네랄의 원천이며 피루 베이트와 글리신은 특정 미생물 성장에 유리한 화합물입니다. 포도상 구균 (Staphylococcus aureus).

선택적

Baird Parker 한천은 동식물의 번식을 억제하는 물질을 포함하고 있기 때문에 선택적으로 개발됩니다. S. aureus. 억제 화합물은 염화 리튬 및 칼륨 텔 라이트.

차동

이 수단을 사용하면 S. aureus 나머지 응고 효소 음성 포도상 구균 (Staphylococci). S. aureus 텔루 라이트를 흑색 메탈리 텔 루륨으로 환원시켜 흑색 또는 진회색 콜로니를 형성하는 능력이있다.

마찬가지로, 계란 노른자는 효소 lecithinase와 lipase의 존재를 증명하는 기질을 제공합니다. S. aureus 그것은 양성 레시틴 분해 효소이며, 따라서 콜로니 주위에 맑은 후광이 관찰되어 레시틴이 가수 분해되었음을 나타낸다.

이 의미에서 빛이 밝은 주변에 밝은 흑색 또는 어두운 회색 식민지의이 한천에서의 출현은 S. aureus. 

침전 영역이 형성되면, 이는 리파제 활성이 있음을 나타낸다. 어떤 종류의 S. aureus 그들은 긍정적 인 lipase 및 기타 부정.

이벤트가 S. aureus 리파아제가 양성인 경우 검정 또는 어두운 회색 콜로니 주위에 불투명 한 영역이 나타나고 레시틴 분해 효소의 작용으로 맑은 후광이 관찰됩니다..

박테리아 이외의 식민지 S. aureus 이 배지에서 자랄 수 있으면 주위에 후광이없는 무색 또는 갈색의 식민지가 생길 것입니다.

불규칙한 검은 색 식민지는 무색 경계선이 있건 없건간에 볼 수 있지만 명확한 후광은 없습니다. 이 식민지는 고려되지 않아야한다. S. aureus.

준비

난황 유제

신선한 닭고기 달걀을 가지고 잘 씻고 2 ~ 3 시간 동안 70 % 알코올에 담습니다. 그런 다음 알은 무균 적으로 열리고 계란 흰자는 노른자와 조심스럽게 분리됩니다. 이후에 50ml의 난황을 취하여 50ml의 멸균 생리 학적 용액.

1 % w / v의 칼륨 텔루 라이트

일부 상업용 주택은 1 % 칼륨 텔루 라이트를 사용할 준비가되어 있습니다. 매체가 응고되기 전에 매체에 첨가된다..

이 용액을 실험실에서 준비하려면 1.0g의 칼륨 텔 라이트 (petite tellurite)를 칭량하고 물의 일부에 용해시킵니다. 이어서, 물의 양은 100 ml로 완료된다. 용액은 여과 방법으로 멸균되어야한다..

배지의 준비

탈수 된 배지 60g을 달아 증류수 940ml에 녹인다. 혼합물을 약 5 분에서 10 분 동안 그대로 두십시오..

용해 과정을 개선하기 위해 자주 매체를 교반하여 열을가한다. 1 분 동안 끓여주십시오. 121 ° C에서 15 분간 오토 클레이브에서 소독하십시오..

45 ° C의 온도에 도달 할 때까지 기다린 다음 50ml의 달걀 노른자 유제와 10ml의 1 % 텔루 라이트를 넣으십시오. 잘 섞어서 멸균 배양 접시에 15-20ml 씩 공급하십시오..

응고시키고, 반창고로 뒤집어서 사용하기 전까지 냉장고에 보관하십시오..

준비된 배지의 최종 pH는 6.8 ± 0.2이어야한다..

샘플을 심기 전에 플레이트가 주변 온도에 도달 할 때까지 기다리십시오. 줄무늬로 표면을 뿌리거나 표면에 뿌리 내고 Drigalski 주걱으로 뿌리십시오..

탈수 된 매질의 색은 연한 황색이며 준비된 매질의 색은 연한 황색.

사용

임상 샘플

임상 샘플은 플레이트의 한쪽 끝에서 재료의 일부를 배출하여 직접 뿌려지며, 거기에서 고갈되면 흘러 나옵니다. 35-37 ° C에서 24 시간에서 48 시간 동안 품어 낸다..

음식 샘플

식품 시료 10g을 달아 0.1 % peptonated water 90ml로 균질화하고, 필요하면 희석액을 준비한다. 준비된 솔루션 0.3 ML과 접시를 triplicate에 접종하고 Drigalski 주걱으로 표면에 뿌리다. 35-37 ° C에서 24 시간에서 48 시간 동안 품어 낸다..

이 방법론은 얻은 전형적인 콜로니 수를 계산할 수있게하며, S. aureus 1 g / ml 샘플 당 10 CFU 초과.

금액이 S. aureus 그것이 작거나 동반 식물이 많이있는 경우, 10 % NaCl 및 1 % 피루브산 나트륨으로 tripticase soy broth에서 샘플을 풍부하게하는 것이 좋습니다. 이것은 S. aureus 동반 식물상의 발생을 억제 할 것이다. 흐린 튜브는 Baird Parker 한천에 뿌려집니다..

물 샘플

진공 여과 시스템에서 멸균 된 물 100ml를 여과 한 다음 0.4 마이크론 미세 다공성 막을 살균 클램프로 제거하고 베어드 파커 플레이트에 놓습니다. 35 ~ 37 ℃에서 24 ~ 48 시간 동안 배양하십시오. 이 기법은 다음과 같은 일반적인 콜로니 계수를 허용합니다. S. aureus.

품질 관리

Baird Parker 한천의 품질을 평가하기 위해 알려진 균주를 사용할 수 있습니다. 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ATCC 25923, 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ATCC 6538, 표피 포도상 구균 ATCC 12228, 대장균 ATCC 25922 또는 프로 테우스 미라 빌리스 ATCC 43071.

균주의 경우 S. aureus ATCC는 텔루 라이트를 감소시키는 것으로 알려져 있으며, 이들은 긍정적 인 리파아제 및 레시틴 분해 효소입니다. 따라서 만족스러운 개발이 이루어져야하고 검은 중심과 무색의 가장자리가있는 볼록한 콜로니가 성장해야하며 불투명 한 후광과 다른 후광이 외부 투명.

한편, S. epidermidis 이 배지에서 회색 빛에서 갈색으로 변하는 흑색 콜로니가있을 것으로 예상되며, 후광이 없다.

~까지 대장균 및 P. mirabilis 전적으로 또는 부분적으로 금지 될 것으로 예상됩니다. 성장하는 경우, 갈색의 콜로니는 불투명 한 영역이 없게 될 것이고 명확한 후광.

권장 사항

-텔루 라이트와 노른자를 넣은 후 매체를 가열하면 안됩니다.

-난황 유제의 제조 및 매질에서의 첨가는 오염의 매우 취약한 단계이다. 극도의주의를 기울여야한다..

-전형적인 식민지가있는 경우 S. aureus 상기 균주에 응집균 시험을 장착하여 보강되어야한다.

-응고 효소에 대한 의심스러운 결과가있는 경우 다른 확인 시험을 수행해야합니다.

-전형적인 식민지의 존재를 혼동하지 않도록 조심하십시오. S. aureus 검은 색의 불규칙한 식민지와.

참고 문헌

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  2. BD 실험실. 베어드 파커 한천. 2006. 사용 가능 : bd.com
  3. 영국 실험실. 베어드 파커 한천 기지. 구매 가능 : britanialab.com
  4. Francisco Soria Melguizo Laboratories. 베어드 파커 한천. 이용 가능 : http://f-soria.es/Inform
  5. 영국 실험실. 칼륨 텔루 라이트. 구매 가능 : britanialab.com
  6. Alarcón-Lavín M, Oyarzo C, Escudero C, Cerda-Leal F, Valenzuela F. Carrying 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) enterotoxigenic type A, 음식물 취급자의 인두 비강. Rev Med 칠레 2017 년; 145 : 1559-1564
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