한천 BHI 재단, 준비 및 사용



그 BHI 한천 또는 두뇌 심혼 주입 한천은 영양이있는 단단한 문화 매체입니다. 스페인어에서는 뇌 심장 주입 한천으로 간주합니다. 그것은 비 선택적 배양 배지입니다. 즉 모든 종류의 그람 양성균과 그람 음성균이 개발 될 수 있으며 일부 효모 및 사상균도 개발 될 수 있습니다..

그것은 송아지 뇌와 심장 주입, 동물 조직의 소화 가수 분해물, 카제인 췌장 가수 분해물, 염화나트륨, 포도당, 인산이 나트륨 및 한천으로 구성됩니다.

BHI 한천은 세균학 실험실에서 가장 빈번한 배양 배지 중 하나입니다. 1 차 배양 물, 다른 선택 배지에서 얻은 콜로니의 계대 배양 물 또는 실험실에서의 균주 유지를 위해 보충제없이 사용할 수 있습니다.

다른 한편, 그것은 혈액 한천과 초콜릿 한천과 같은 풍성한 미디어의 준비에 기지로 사용되는 이상적인 매체입니다. 두 가지 모두 요구되는 미생물을 영양적인 관점에서 분리하는 데 이상적입니다. 그러나 포도당이 포함되어 있기 때문에 용혈 패턴을 관찰하는 것은 적절하지 않다는 점을 고려해야합니다.

마찬가지로, BHI 한천은 일반적인 배지에서 어려운 성장의 병원성 미생물을 분리하기위한 특별한 수단의 준비에 사용될 수있다. 헤모필루스 sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae 및 Histoplasma capsulatum.

항생제 첨가제 인 BHI 한천은 곰팡이의 분리를위한 선택 배지가됩니다.

색인

  • 1 재단
  • 2 준비
    • 2.1 웨지
    • 2.2 판
    • 2.3 혈액 한천 준비
  • 3 용도
    • 3.1 보충제없이 사용
    • 3.2 다른 배지를 준비하기위한 한천으로서
  • 4 품질 관리
  • 5 참고

재단

적당히 까다로운 미생물을 분리하고 혈액 및 기타 영양 보충제의 첨가로 농축을 증가시킬 수있는 영양가있는 배지입니다.

그것은 비 선택적 배양 배지이므로 대부분의 그람 양성균과 그람 음성 박테리아뿐만 아니라 일부 균류의 증식을 허용합니다. 그러나, 그것은 항생제의 추가와 선택적 될 수 있습니다.

배지는 송아지 뇌 및 심장, 동물 조직 및 카제인 췌장 가수 분해물로부터의 펩타이드 가수 분해물의 주입을 포함한다; 이 모든 화합물은 비타민, 아미노산, 질소 및 탄소의 공급원으로 작용합니다..

포도당은 일단 발효되면 미생물에 에너지를 공급하는 탄수화물입니다. 반대로, 염화나트륨과 인산이 나트륨은 삼투 평형을 유지하고 중성에 가까운 pH를 제공합니다. 마지막으로, 한천은 배지에 견고한 일관성을 부여합니다.

준비

건조한 배지 52g을 달아 증류수 1L에 녹입니다. 끓을 때까지 혼합물을 열원으로 가져와 용해 과정 중에 자주 저어 준다..

첨가제없이 BHI 한천의 쐐기 또는 플레이트를 준비 할 수 있습니다..

웨지

쐐기의 준비를 위해 각 튜브의 절반을 채울 때까지 준비를하십시오. 고형화 될 때까지베이스에 누워서 121 분 동안 15 분 동안 오토 클레이브에서 멸균하십시오. 그런 다음 사용하기 전까지 냉장고에 보관하십시오..

플레이트

용해 된 혼합물을 121 ℃에서 15 분간 오토 클레이브 한 후, 50 ℃로 식힌 다음 20ml의 배지를 멸균 배양 접시에서 제공한다. 그들은 사용하기 전까지는 고형화, 반전 및 냉장고에 보관할 수 있습니다. 설치 전에 판재가 실온이되도록하십시오..

배지의 pH는 7.4 ± 0.2이어야한다..

준비가되지 않은 매체는 베이지 색이며 연한 호박색입니다..

혈액 한천 준비

배지를 멸균 한 후 약 45 ~ 50 ℃의 온도로 식힌 다음이 때 혈액 (50ml)을 가하고 가볍게 혼합하여 균질화하고 무균 적으로 각 페트리 접시에 20ml 씩 넣습니다. 판에 거품이 생기면 버너의 불꽃을 신속히 거품 위로 지나쳐 버려야합니다..

마찬가지로 특수 매체는 혼합물이 45 ~ 50 ° C의 온도에 도달하면 해당 첨가제를 첨가하여 제조 할 수 있습니다.

매체는 체리 레드.

용도

보충제없이 사용

첨가제가 첨가되지 않은 BHI 한천은 1 차 배양과 추후 식별을 위해 보통 또는 중간 정도의 미생물의 순수 균주를 재배하는 데 유용하다.

그것은 밝은 색의 배지이므로 안료를 관찰하는 데 이상적이며 또한 간섭 물질을 함유하지 않기 때문에 산화 효소 및 카탈라아제와 같은 생화학 검사를 수행하거나 여기에서 비롯된 식민지에서 다른 생화학 검사를 수행 할 수 있습니다 한천.

마찬가지로, BHI 한천 웨지는 실험실에서 정해진 시간 동안 균주를 유지하는 데 널리 사용됩니다 (박테리오테카).

박테리아 균주가있는 표면에 심어진 판 또는 쐐기를 37 ° C에서 24 시간에서 48 시간 동안 배양합니다. 곰팡이의 경우 온도와 배양 시간은 원하는 곰팡이의 유형에 따라 달라집니다.

다른 배지를 준비하기위한 한천으로서

이베이스로 풍부하고 선택적인 매체를 준비 할 수 있습니다..

풍성한

이의 주요 기능은 미생물학 실험실에서 일상적으로 사용하기위한 혈액 한천 준비의 기초 역할을하는 것입니다. 특히, BHI 염기는 균주 분리에 도움이된다. 연쇄상 구균 sp. 그러나, 포도당을 함유하고 있기 때문에 용혈 패턴의 관찰에 적합하지 않은 단점이있다.

그것은 또한 토끼의 격리에 대한 토끼 또는 말 혈액 한천의 준비에 사용됩니다 헤모필루스 sp. 더 나은 결과를 얻으려면 농축 보충제 (IsoVitaleX).

샘플이 한천에 호흡 기관에서 오는 경우 bacitracin은 동반 식물상을 억제하고 줄기의 회복 확률을 높이기 위해 첨가 할 수 있습니다. 헤모필루스 sp.

다른 한편으로, 혈액 한천 (양 또는 인간)은 텔루 라이트 시스틴으로 분리하여 분리 할 수 ​​있습니다 코리 네 박테 리움 디프테리아. 마찬가지로, 토끼의 혈액 한천을 준비하는 것은 유용하며, 시스틴과 포도당을 첨가하여 Francisella tularensis.

혈액 한천 플레이트의 시딩은 소진에 의해 이루어지며, 미 호기성 (5-10 % CO)에서 24-48 시간 동안 35-37 ℃에서 배양된다.2).

선택적

항생제가 첨가 된이 배지는 Sabouraud 한천을 곰팡이의 격리를 대체 할 수 있습니다.

BHI 한천과 클로람페니콜 - 겐타 마이신 또는 페니실린 -, 스트렙토 마이신 및 말 혈액의 조합은 Histoplasma capsulatum.

분리 할 미생물에 따라 35-37 ° C에서 보온 또는 혐기성 균주에서 실온에서 보육하는 것이 좋습니다. 때로는 두 온도 범위에서 배양이 필요합니다..

일부 진균류는 홍역 흰 곰팡이 그들은 7 일 동안 실온에서 배양되어야한다..

품질 관리

준비된 각 배치에서 1 플레이트 또는 웨지를 37 ° C에서 24 시간 배양하고 성장이 없는지 확인하는 것이 좋습니다. 혈액 한천을 준비 할 때 특히 중요합니다. 왜냐하면 쉽게 오염 된 배지이기 때문입니다..

다른 한편, 배지의 품질은 알려진 표준 균주 또는 인증 된 표준 균주를 접종하고 그 발달을 관찰함으로써 평가할 수있다.

이러한 의미에서 첨가제가없는 BHI 한천을 평가하기 위해서는 대장균 ATCC 25922, 포도상 구균 (Staphylococcus aureus) ATCC 25923 또는 칸디다 알비 칸스 ATCC 10231. 그들은 24 시간에서 48 시간 동안 곰팡이가 진행되는 동안 37 ℃에서 배양됩니다. 모든 경우에 만족스러운 성장이 기대됩니다..

혈액 한천 평판을 평가하기 위해  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 또는 Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

박테리아 균주는 microaerophilicus에서 37 ℃에서 24 시간 동안 항온 처리되며, 균류는 7 일 동안 습도 챔버에서 실온에서 배양됩니다. 모든 경우에 만족스러운 성장이 기대됩니다..

참고 문헌

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