기초 lactosado 국물, 준비 및 사용



그 락토스 국물 이는 미생물 분석 가공 식품, 유제품 또는 물 살모넬라 균주의 분리에 미리 보충하는 수단으로 주로 사용되는 액체 비 선택적 배양 배지이다. 이것은 미생물 학적 식품 규격위원회 (ICMPF).

배지는 젤라틴, 고기 추출물 및 락토오스의 효소 분해를 포함하며 세균 증식에 필요한 물질입니다. 또한 유당은 발효 가능한 탄수화물이기 때문에 일부 대장균 군은 가스 생산과 함께 분리 할 수 ​​있습니다.

따라서, 유당 국물은 표준 기술을 가장 가능성 번호 (NMP는 라 우릴 국물 황산을 대체하는 그것에게 훌륭한 대안을 호출, 총과 배설물 대장균의 추정 연구를위한 미국 공중 보건 협회 (APHA)에 의해 트립 토스 추천 ), 음식, 우유 및 표층수, 지하, 레크리에이션, 가정 및 산업 폐기물 샘플의 미생물 분석에 사용됩니다.

색인

  • 1 재단
  • 2 준비
  • 3 용도
    • 3.1 사전 농축
    • 3.2 총 대장균 군 및 대변 군 분석
  • 4 매체의 품질 관리
  • 5 참고

재단

일부 샘플의 미생물 분석을 위해서는 예비 농축 단계가 생존력을 저해하거나 최소화하는 불리한 조건 또는 매우 적은 양의 특정 미생물을 회수 할 수 있어야합니다.

건조 식품 및 가공 식품의 경우, 오염되었을 가능성이 있습니다. 살모넬라 균 sp. 이 경우 박테리아가 존재하면 제품 생산 과정에서 물리적 및 화학적 인 부작용을 겪게됩니다..

이러한 미생물이 중에서도, 더 많은 양의 다른 박테리아의 존재에 의해 발생 된 이러한 탈수 억제 또는 독성 산물에 노출하고 겹치는 불리한 요인에 노출되어 있음.

이러한 의미에서, 락토스 육즙은 미생물의 손상된 구조에 복구 효과를 가지며, 이로 인해 미생물이 회복되고 재생되어 검출 될 수있다.

마찬가지로, 락토스 육즙은 생존력에 영향을 미칠 수있는 억제 물질을 희석시켜 그 생성을 가능하게한다. 또한, 락토스 육즙의 영양 구성은 살모넬라 균 sp 다른 미생물보다.

최종 확인을 위해서는 다른 농작물 수단으로 하위 재배해야한다..

한편, 배지의 조성은 또한 가스를 생성하는 유당 발효 미생물을 검출 할 수있게한다.

준비

1 리터의 락토스 브로스를 준비하기 위해 탈수 된 배지 13g을 달아 1000ml의 증류수에 녹인다..

물속에 매체를 녹이기 위해서, 용액을 약간 가열 할 수는 있지만 너무 많이 가열해서는 안됩니다..

균질 한 후에, 용액을 다음과 같이 제조한다 : 대장균 배양액을 검색하는 데 사용되는 경우, 발효 관에 도입 시험관이있는 랙 더럼 아래 입 준비.

더럼 튜브는 대단히 중요한 세부 사항입니다. 왜냐하면 대장균 검색에서 귀중한 데이터 인 가스의 형성을 감지 할 수 있기 때문입니다.

튜브가 준비되면 10ml의 락토스 브로스를 디스펜서에 넣습니다.이 액은 더럼 튜브 전체를 덮을만큼 충분해야합니다..

락토스 브로스가 사전 농축 국물로 사용된다면 더럼 발효 튜브를 설치할 필요가 없습니다. 이 경우 더 많은 양의 배지 (225 ml)가 필요합니다.이 배지는 500 ml 병, 넓은 입 및 내열성 스크류 캡과 함께 제공됩니다.

이어서, 튜브 또는 플라스크를 121 ℃에서 15 분간 오토 클레이브로 옮긴다..

배지는 25 ℃에서 6.9 ± 0.2의 최종 pH를 유지해야합니다.

와인은 사용하기 전까지 냉장고에 보관됩니다..

사용하기 전에 국물을 실내 온도에서 부드럽게 조절해야합니다.

다른 한편으로, 락토스 브로스는 이중 농도로 제조 될 수있다.

일부 실험실에서는 브로 모 크레졸 퍼플을 pH 지시약 인 락토스 브로스에 첨가하여 색 변화에 의해 락토스 발효가 일어난 튜브를 보여줍니다. 이 경우 배지는 보라색을 띠고 발효가 노랗게 변하면.

용도

미생물학 실험실에서 락토스 브로스는 안정적이고 빠른 결과 (24 ~ 48 시간)를 제공하는 상대적으로 저렴한 배지로 널리 사용됩니다..

물과 음식에서 총 대장균 군 분석에 사용하거나 살모넬라 균에 대한 사전 농축 국물로 사용할 수 있습니다.

사전 농축

사전 농축은 샘플을 풍부하게하기 전에 단계이며, 가공 식품에서 살모넬라 속에 속하는 세균의 회복을 크게 향상시킵니다.

이를 위해 고형 식품 (25 그램) 또는 액체 (25 ml)의 샘플을 225 ml의 락토스 브로스에 넣고 24 시간에서 48 시간 동안 배양합니다. 이어서, 셀레 나이트 시스틴 배지 또는 테트라 티온 산염 배지를 농축 배지에서 계대 배양한다. 그런 다음 선택적 미디어 XLD 및 SS로 전달됩니다..

총 대장균 군 분석

분변 오염의 지표로서 훌륭한 수단입니다..

그러므로, 유당 배지는 대장 번호 연구에 의한 대장균 연구의 추정 단계에 이상적이다.

샘플 된 대장균보다 적은 의심되는 샘플 볼륨 (10 mL)을 접종하면서 대장균 다수 그 하부 량 (1 ㎖) 의심되는 샘플은 식균.

10 희석이 분석을 위해 만들어진다.-1, 10-2, 10-3, 사용 된 각 농도에 대해 3-5 관 전지를 형성.

각각의 희석액으로부터 동일한 부피를 락토스 수프에 뿌린다.

튜브를 24 시간 동안 배양했다. 음성 인 배양액은 24 시간 이상 배양됩니다..

결과의 해석은 두 가지 특성을 관찰함으로써 이루어집니다 : 첫 번째는 혼탁의 유무이며,이 매체는 pH 지시약을 포함하지 않으므로 색의 변화가 없습니다.

두 번째는 가스의 생산 여부입니다. 가스는 Durham 튜브에서 쉽게 나타납니다. 하나 이상의 공기 방울이 내부에 나타납니다..

두 특성이 모두 관찰되면 양성으로 간주됩니다. 즉 가스 생성으로 인한 탁도입니다. 양성 시험관은 확증 용 배지 (브리튼 그린 2 % 담즙 및 EC 브로스).

매체의 품질 관리

- 배지를 준비 할 때, Durhams 관의 목적이 대장균 군에 대한 연구라면 잊어서는 안된다..

- 멸균하기 전에 과열하지 마십시오..

- 멸균하기 전에 시험관에 배양하십시오..

- 매체의 준비가 3 개월 이상인 경우에는 사용하지 마십시오..

- 매체의 일반적인 특성에 변화가 생기면 사용하지 마십시오..

- 락토스 배지를 준비 할 때 다음과 같은 균주를 심어 품질을 테스트하십시오. 대장균, Enterobacter aerogenes , Citrobacter freundii 및 Klebsiella pneumoniae. 그들은 가스 생산 (긍정적 인 통제)과 함께 매우 잘 자랍니다..

- 또한 다음을 포함 할 수 있습니다. Pseudomonas aeruginosa, 살모넬라 균 티피 머륨 o Enterococcus faecalis, 잘 자라지 만 가스가 생성되지 않는다 (Negative control).

- 탈수 된 매질의 원래 색은 베이지 색이며 매질은 매우 투명하고 투명한 황색으로 준비되었음을 유의해야합니다. 색상이나 외관에 변화가있는 경우 동일한 색상의 변색이있을 수 있습니다..

참고 문헌

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