몫:
한천 초콜릿 기초, 사용 및 준비
그 초콜릿 한천 그것은 고형, 풍부, 비 선택적 및 비 차별 배양 배지입니다. 그것은 영양의 관점에서 요구하는 미생물의 격리를 위해 주로 사용되지만 어떤 종류의 박테리아도 자랄 수 있습니다.
이 유틸리티는 CSF 및 활액과 같은 무균 종자 샘플, 특히 증가 이유이다. 또한, 비록 그 polymicrobial 샘플을 심는 선택 수단 내에 포함하지만, 이러한 경우에 수반되는 식물을 억제하는 항생 물질의 첨가가 필요.
이 매체는 초콜릿과 매우 유사한 갈색 특유의 특성을 지니고 있습니다. 준비는 혈액 한천과 매우 유사합니다.이 경우에만 혈액을 가열해야 적혈구가 파괴됩니다.
혈액 한천과 같은 그 준비는 오염되기 쉽기 때문에 매우 섬세합니다. 이러한 이유로 많은 실험실은 상업용 주택이 이미 준비한이 매체를 구입하여 품질을 보장합니다..
색인
- 1 재단
- 2 용도
- 2.1 콜롬비아 한천으로 제조 한 초콜릿 한천
- 2.2 GC 한천 (gonococci 용)으로 제조 한 초콜릿 한천
- 2.3 Müeller Hinton 한천으로 제조 한 초콜릿 한천
- 2.4 Thayer Martin 한천으로 제조 한 초콜릿 한천
- 3 준비
- 3.1 계산
- 3.2 무게와 용해
- 3.3 소독
- 3.4 혈액의 응집
- 3.5 피를 사용하지 않고 초콜릿 한천을 준비하는 또 다른 방법
- 4 품질 관리
- 5 참고
재단
이 배지는 영양분이 풍부한 한천 및 가열 된 혈액으로 구성됩니다. 적혈구의 용혈은 속 (genus)과 같은 일부 미생물의 성장에 필요한 인자 X (hemin) 및 인자 V (NAD)를 제공합니다. 헤모필루스. 또한 격리에 매우 유용합니다. Neisserias sp.
혈액 한천처럼 다른 매체도 필요에 따라 기본 한천으로 사용할 수 있습니다. 사용 된 배지 중에는 두뇌 심장 주입과 trypticase soy agar가 있지만 가장 권장되는 것은 Columbia agar, Müeller Hinton, GC agar 및 Thayer Martin agar입니다..
초콜릿 한천의 일부 변종은 상업적으로 이용 가능한 Isovitalex 또는 Polivitex라는 보충제를 포함합니다.
이 보충제는 비타민 B를 함유하고 있습니다.12, L 글루타민, 아데닌, 구아닌 클로라이드, p- 아미노 산, 니코틴 아마이드 아데닌 다이 뉴클레오타이드 (NAD), 티아민 피로 인산, 질산 철, 티아민 염산염, 시스테인 염산염, L- 시스틴 및 글루코오스.
초콜렛 한천은 혈액 한천보다 풍부하지만 용혈 패턴을 관찰 할 수 없다는 점에 유의해야합니다.
용도
콜롬비아 한천으로 제조 된 초콜릿 한천
이 매체는 췌장은 카세인, 심장, 소화 소화 고기, 염화 나트륨, 한천, 효모 추출물, 옥수수 전분의 소화가 포함되어 있습니다. 또한 비타민, 미네랄 및 필수 아미노산이 풍부하다.
가열 된 혈액을 함유 한이 염기는 Neisseria 속 세균의 분리에 이상적입니다. 한편, Brucella의 보충 물을 배지에 첨가하면 상기 미생물을 분리 할 수있다. 말 혈액을 사용하여 결과가 개선됩니다..
GC 기본 한천 (gonococci) 용으로 준비된 초콜릿 한천
이 배지는 펩톤, 옥수수 전분, 일 염기 및 이염 기 완충액, 염화나트륨 및 한천.
대부분의 초콜릿 한천 발표 상업적이 기본으로 준비하고 혈액을 가열 포함하지만, 헤민의 합성 혼합물과 성장 인자, 비타민, 미네랄, 아미노산, 포도당 및 요인 V의 화학 보충.
Müeller Hinton 한천으로 제조 된 초콜릿 한천
그것은 요구되는 미생물의 항균 감수성 검사를 수행하는데 사용된다. Streptococcus pneumoniae 5 % 가열 된 램 혈액 사용.
또한 Neisserias와 Haemophilus의 1 차 분리를 위해 사용되지만, 헤모필루스 말 혈액의 사용은 인자 X와 V의 풍부한 공급원이기 때문에 바람직합니다.
다른 한편, 파종 될 표본이 비 살균 영역에서 나온다면 항생제를 첨가하여 해당 지역의 식물상을 억제하는 것이 좋습니다..
속의 박테리아의 존재가 의심되는 호흡기 샘플의 예 헤모필루스 바시 트라 신은 성장을 억제하는 데 사용됩니다. 포도상 구균, Micrococcus, Streptococcus 및 부영양화 세균.
성기 찬 소의 샘플의 경우 의심되는 곳 Haemophilus ducreyi, 힌튼 한천 5 % 말 혈액 chocolatizada, 1 % 이소 비타 렉스 농축 및 3 UG / ㎖ 반코마이신에 - 뮐러을 다음과 같이 초콜릿 한천 준비를 성공적으로 사용되어왔다.
Thayer Martin 한천으로 준비된 초콜릿 한천
이 매질은 Neisseria gonorrhoeae. 동반 식물상을 억제하기 위해서는 항생제가 들어 있어야합니다. 어린 양 피가 사용됩니다..
준비
사용하는 한천을 준비해야한다. 그들은 탈수 된 배설물의 뒷면에 있습니다. 그들은 보통 1 리터의 배양 배지를 준비하기 위해 얼마나 많은 양을 계량해야 하는지를 기술한다.
실험실에서는 필요한 정확한 양을 준비 할 수 있으며, 1 리터보다 많거나 적을 수 있습니다..
계산
원하는 볼륨을 준비하기 위해 얼마나 많은 양을 계량해야 하는지를 계산하기 위해 세 가지 규칙이 만들어집니다. 예 :
1 리터의 경우 40gr의 무게가 필요하고 실험실에 800ml가 필요하면 다음과 같이 말합니다 :
1000 ml -40 gr
800 ml - X
수식은 다음과 같습니다.
X = 32 gr (800 ml의 무게).
무게와 용해
우리는 필요한 양의 무게를 달아 물과 함께 fiola에 넣습니다..
적당한 열로 가열하고 탈수 된 배지가 완전히 용해 될 때까지 회전 운동으로 부드럽게 섞어서 1 분 동안 끓여줍니다..
소독하다
121 ℃에서 20 분 동안 배양액을 멸균하기 위해 오토 클레이브에 피라를 도입한다.
혈액의 골재
오토 클레이브를 떠날 때 매체의 온도가 약 56 ~ 70 ° C가 될 때까지 방치하여 혈액을 넣고 매체가 갈색이 될 때까지 혼합합니다.
당신이 보충 교재를 첨가하기 위하여려고하는 경우에, 이것은 그것을 할 시간이다. 이어서 각 멸균 배양 접시에 20ml 씩 섞는다..
전체 절차는 층류 후드 또는 분젠 버너 주위에서 수행되어야합니다..
냉장고에 넣고 굳혀 냉장고에 거꾸로 세워 놓는다..
혈액을 사용하지 않고 초콜릿 한천을 준비하는 또 다른 방법
상기와 같이 기본 배지를 제조하고, 시판되는 탈수 된 헤모글로빈을 용해시키고 오토 클레이브 내에서 살균한다.
두 용액을 50 ° C로 식히고 보충제를 넣고 첨가하십시오. 무균 상태에서 혼합하고 무균 페트리 접시에서 봉사하십시오.
품질 관리
혈액이 표시된 온도에 놓이는 것이 중요합니다. 적혈구를 용해시키고 동시에 열 감수성 인 인자 V를 유지하는 것이 이상적이기 때문입니다.
한천 표면에 기포가 없어야합니다. 100 개 플레이트의 각 배치는 스토브에서 1 ~ 2 개의 플레이트를 37 ° C에서 24 시간 배양하여 불임을 점검해야합니다.
최상의 결과를 얻으려면 초콜릿 한천을 준비 직후에 사용해야합니다..
임상 적 중요성이있는 주된 미생물의 성장을 위해 신선하게 준비된 배지의 효능을 평가하기 위해 세균 균주를 시험실에서 사용해야한다.
참고 문헌
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