문화 매체의 준비, 목적 및 단계
그 배양 배지의 준비 그것은 원하는 미생물의 성장을 위해 실험실에서 사용되는 일상적인 방법론입니다. 배양 배지는 미생물 개체군의 발달에 필요한 모든 영양소를 함유 한 고체, 액체 또는 반고체 제제입니다.
일반적으로 미생물을 키울 수있는 방법은 단백질과 아미노산이 풍부하며 일반적으로 비타민, 혈액, 혈청 등과 같이 연구하고자하는 유기체의 성장을 돕는 성분이 포함되어 있습니다..
해당 미생물의 필요에 따라 그 구성이 다양하기 때문에 일반 또는 보편적 인 배양 배지는 없다. 일부 박테리아는 어떤 배양 배지에서도 발생하지만 다른 것들은 특별한 요구 사항이 있습니다..
색인
- 1 구성 요소는 무엇입니까??
- 1.1 한천
- 1.2 유체
- 1.3 추출물
- 1.4 펩톤
- 1.5 충격 흡수 장치
- 2 목표
- 3 미디어 유형
- 3.1 그것의 구성에 기초를 두어
- 3.2 미생물의 유형에 기초
- 4 단계
- 5 참고
그것은 무엇으로 이루어 집니까??
곰팡이 나 세균과 같은 미생물은 작은 크기 때문에 개별적으로 연구 할 수 없습니다. 그러므로, 그들은 인구의 상당한 증가를 허용하는 인공적인 수단으로 재배되어야한다..
예를 들어, 우리가 박테리아를 연구하기를 원한다면 우리는 번식하여 식민지를 형성 할 수있는 적절한 조건을 제공해야합니다 (육안으로 관찰 할 수 있음).
배지의 준비는 배양하고자하는 미생물의 종류에 따라 크게 달라진다. 그것을 준비하기 전에, 일하는 신체의 기본적인 영양 요구를 알아야합니다.
다음으로, 배양 배지에서 사용되는 가장 보편적 인 구성 요소는 그들의 준비에 대한 일반적인 생각을 갖기 위해 기술 될 것이다 :
한천
그것은 작물에서 겔 화제로 사용되며 고체 또는 반고체 매질을 찾을 때 첨가됩니다. 배지의 준비에 사용 된 첫 번째 응고제는 젤라틴 이었지만, 1883 년 한천은 W. Hesse의 세균학 세계에 도입되었습니다.
박테리아 학적 한천은 조류로부터 추출 된 복합 가지의 다당류를 주성분으로 갖는다. 이 화합물은 아이스크림 및 잼과 같은 일반적인 식품의 증점제로 사용됩니다..
여러 가지 이유로 미생물학에서 매우 중요한 요소입니다. 주로 미생물이 분해되지 않기 때문에 100 ° C의 온도에서 액화되고 45 ° C 이하가 될 때까지 액체 상태를 유지합니다.
고체 배지를 준비하고자 할 때 한천 농도는 약 1.5 %이어야하며 반고체는 0.3 ~ 0.5 %.
유체
병원성 미생물의 배양은 체액이 필요하므로 자연 환경 에서처럼 발달 할 수 있습니다. 이러한 이유로 전체 또는 제세동 혈액이 추가됩니다. 유체는 건강한 동물로부터 추출되고 일단 멸균되면 배양 배지에 첨가됩니다.
추출물
그들은 다른 동물 부분 (고기 또는 간과 같은) 또는 야채 (씨앗)에서 얻은 및 붙여 넣기 또는 분말의 형태로 고체 농축을 얻기 위해 처리됩니다. 가장 흔한 것은 누룩, 맥아 및 고기입니다..
펩톤
이러한 유기 화합물은 동물 또는 식물 조직의 효소 적 또는 화학적 가수 분해에 의해 얻어진다. 목적은 단백질의 기본 단위 인 아미노산이 풍부한 콘텐츠를 추가하는 것입니다..
충격 흡수 장치
버퍼 또는 버퍼 시스템은 pH의 급격한 변화를 방지하고 신체가 허용하는 최적의 범위를 유지하도록 돕습니다..
일부 박테리아는 알칼리성 배지를 선호하지만 대부분의 미생물은 pH 7에서 제대로 발달 할 수 있습니다. 그러나 6에서 9 사이의 pH 차이에 저항하는 박테리아가 있습니다.
pH에 민감한 종에서 과도한 양의 수소 또는 히드 록실 이온에 의한 손상은 발생하지 않지만 세포를 침투 할 수있는 약산이나 염기의 증가에 의한 손상.
또한이를 모니터링하고 발효 또는 기타 공정으로 인한 편차를 피하기위한 지표가 추가되었습니다.
목표
배양 배지를 준비 할 때 주된 목적은 분리되기를 바라는 유기체를 성공적으로 개발할 수 있도록 모든 필요한 구성 요소를 추가하는 것입니다. 원하는 성분을 얻기 위해서는 성분과 영양분의 가장 효과적인 조합을 확인해야합니다..
배지의 준비와 저장은 환경의 조성과 영양소의 이용 가능성에 의존하기 때문에 성공적인 성장을 보장하는 데 중요합니다..
미생물의 배양은 수용되는 빛의 세기, 온도 및 산도 또는 배지의 알칼리성과 같은 배양 배지 외부의 몇 가지 요인에 의해 영향을받는 일임을 고려해야합니다. 따라서 이러한 각 변수를 고려해야합니다..
미디어 유형
구성에 따라
작물의 세 가지 주요 유형이 있습니다 : 자연적 또는 경험적, 반합성 및 정의 된 합성 또는 화학적 수단.
자연 환경
자연 환경에서는 정확한 조성을 알 수 없습니다. 여기에는 우유, 희석 된 혈액, 야채 주스, 추출물 및 육류와 펩톤의 주입과 같은 재료가 포함됩니다. 경제적 인 이유로, 대두 추출물, 유장, 당밀 등과 같은 저비용 성분이 종종 첨가됩니다..
반합성 미디어
그것의 구성이 부분적으로 알려지면 반합성 매체라고합니다. 한천을 포함한 모든 배지는 반합성 배지가된다..
그중 우리는 아빠 덱스 트로 오 한천, 체 자크 독스 한천, 귀리 한천, 펩톤 고기 한천 등을 가지고 있습니다.
합성 또는 화학 정의 된 매체
이 경우 탄소, 질소, 황, 인 및 다른 성장 인자 원의 양과 관련하여 배지의 조성은 완전히 알려져 있습니다. 다른 연구자에게 재현 가능한 결과를 얻고 자 할 때 매우 유용합니다..
소위 "특별한 성장 요구 사항을 가진 미생물"의 경우 필요한 구성 요소를 추가해야합니다. 이 유형의 예는 락토 바실러스.
미생물의 유형에 기초
마찬가지로 미생물의 종류에 따라 다른 배지도 분류 할 수 있습니다. 이 원칙에 따라 우리는 다음과 같은 농축, 선택 및 차별의 일반적인 수단을 가지고 있습니다. 각각에 대해 아래에서 설명합니다.
일반적인 수단
이들은 다양한 미생물의 개발을 인정합니다. 어떤 유기체가 성장을위한 특별한 조건을 필요로한다면이 유형의 작물에서 성공적으로 개발할 수 없을 것입니다.
농축 수단
농축 수단은 특정 유형의 미생물의 성장을 선호하지만 다른 종류의 미생물이 번식하는 것을 막기위한 물질이 추가되지 않았습니다..
선택적 미디어
그들은 미생물의 특정 성장을 찾으며, 균류, 박테리아, 원생 동물이라고 부릅니다. 이를 위해 다른 사람들의 발달을 방해합니다..
이 목표를 달성하기 위해서는 많은 미생물 그룹에 치명적인 화학 화합물을 첨가 할 수 있으며, 관심있는 미생물에 무해하거나 미생물에 의해서만 동화 될 수있는 에너지 원을 추가 할 수 있습니다.
선택적 배지는 병원성 미생물을 자라기 위해 의학 샘플을 채취 할 때 사용됩니다. 여기에서 병원균의 성장을 선호하고 환자로부터 정상적인 미생물 군집의 발생을 억제하는 것이 필요하다..
예를 들어 비스무트 아황산염 한천은 그람 양성균과 위장관에서 발견되는 많은 박테리아의 증식을 허용하지 않습니다. 따라서 장티푸스를 일으키는 그람 음성균을 배양하는 데 사용됩니다, 살모넬라 티피 분변 샘플에서.
차동 미디어
이 유형은 관심있는 유기체 (예를 들어, 그것의 신진 대사의 특성)의 일부 진단 적 특징을 사용하여 동일한 환경에서 자라는 다른 종에 대해 이들을 식별 할 수 있습니다.
차동 매체 및 선택 배지는 모두 임상 미생물학 및 공중 보건 분야에서 매우 유용합니다. 왜냐하면 이러한 분야는 열악한 위생 상태 또는 조건과 관련된 특정 미생물의 존재를 탐지해야하기 때문입니다..
지표 물질을 작물에 첨가하여 원하는 콜로니에 특유의 특성을 부여 할 수 있습니다. 예를 들어, 한천 - 에오신 - 메틸렌 블루 (약자로 EMB)와 MacConkey - 한천에 락토오스와 pH 지시약.
따라서, 유당을 발효시키고 알데히드를 생성 할 수있는 능력을 가진 배지에서 콜로니가 개발되면, 특별한 색으로 관찰 될 수있다.
단계
현재 배지는 동결 건조 된 형태로 구입할 수 있습니다. 따라서 준비가 용이 해지고 제품 만 다시 수화됩니다. 내용물의 무게를 측정해야하며 (준비하려는 최종 수량을 고려하여) 제품의 모든 표시에 따라 증류수에 용해시켜야합니다.
이후의 살균을 위해 액체 배지의 내용물을 원하는 용기 (페트리 접시, 튜브 등)로 나누어야합니다. 고체 배지를 분배하기 위해서는 마이크로 웨이브를 사용하거나 물을 수조에 넣고 용융시킬 필요가 있습니다. 매체의 pH를 조정해야합니다..
보통 한천은 시험관 또는 페트리 접시에 사용됩니다. 한천이 기울어 진 위치에서 응고되면, 최종 말단 모서리가 대각선이되도록 적절한 각도로이 배열을 플루트 피크 또는 경 사진 튜브라고합니다. 한천이 완전히 수직으로 고형화되면 "깊은".
오토 클레이브를 사용하여 매체를 멸균 한 후 냉각시킬 수 있습니다. 이들은 미생물이없는 환경에서 처리해야하며 가장 일반적인 방법은 주변에서 무균 환경을 보장하는 조명을 사용하는 라이터로 작업하는 것입니다.
참고 문헌
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