절반 SIM 기반, 준비 및 사용

그 SIM 절반 반고체 및 차등 한천으로 주로 Enterobacteriaceae와 같은 세균의 동정을 돕기 위해 고안되었습니다. 그것은 triptein, 펩톤, 황산 철, 황산 암모늄, 티오 황산나트륨 및 한천.

이 매질은 세 가지 중요한 시험의 실행을 허락합니다 : 수소 황화물 (H₂S), 인돌 형성 및 운동성, 그러므로 약어 약어. 그것의 중대한 유용성 때문에 그것은 세균학 실험실에서 결여 될 수 없다.

다른 매질과는 달리 이것은 일부 박테리아의 이동 능력을 감지 할 수 있도록 반고체 여야합니다. 이러한 의미에서,이 시험은 Enterobacteriaceae에 대해서는 매우 잘 작동하지만 그람 음성, 비 발효성 간균에는 효과가 없으며 예를 들어 보류중인 방울과 같은 다른 방법을 사용하는 것이 좋습니다.

SIM 매체는 다른 박테리아와 관련하여 일부 박테리아를 특성화하는 특정 특성을 구별 할 수있게합니다. 예를 들어 대장균 H가 됨으로써 구별된다.₂S (-), Indole (+) 및 운동성 (+)을 나타내는 반면, 프로 테우스 미라 빌리스 그것은 H 다.₂S (+), 인돌 (-), 운동성 (+).

색인

• 1 재단
  • 1.1 전원
  • 1.2 황화수소의 생산
  • 1.3 인돌 형성
  • 1.4 운동성
• 2 준비
  • 2.1 하프 SIM
  • 2.2 Kovac의 시약
  • 2.3 에리 리치 시약
• 3 용도
  • 3.1 시드
• 4 품질 관리
• 5 제한 사항
• 6 참고 문헌

재단

황화수소를 생산할 수있는 미생물과 그렇지 않은 미생물을 구별하기 위해 관리하기 때문에 차별화 된 배지입니다. 또한 그것을 형성하지 않는 사람들의 트립토판에서 인돌 (indole)을 형성하는 것들을 강조하고, 마지막으로 움직일 수없는 박테리아와 운동성을 구별합니다.

전원

어떤 배양 배지로서, 요구되지 않는 미생물이 생길 수 있도록 필요한 영양소를 제공하는 요소를 가지고 있습니다. 이러한 요소는 펩톤과 트립 티나.

환경에서 미생물의 발달은이 매질에 의해 평가 된 특성의 존재 유무를 관찰 할 수 있어야한다..

황화수소의 생산

두문자어 SIM의 문자 S는 황화수소 (H₂S). 황화수소를 형성 할 수있는 박테리아는 티오 황산나트륨의 황을 취합니다.

H가 형성되면₂S - 무색의 가스 - 이것은 매체에 존재하는 철염과 반응하여 황화철을 형성하며 명확하게 보여집니다 (검은 색 침전물). H를 형성하지 않는 박테리아₂S, 원래 색상의 중간을 남겨주세요 (베이지).

흑색 침전물의 존재는 운동성의 해석을 방해 할 수 있습니다. 그러나 대부분의 H 생산 장내 세균₂S는 살모넬라 (Salmonella), 프로 테우스 (Proteus) 및 시트로 박터 (Citrobacter)와 같은 양성 운동성이다. 또한, 거의 모든 매체를 덮는 흑색 침전물은 양성 운동성을 시사한다.

인돌 훈련

약자 인 SIM의 두 번째 문자는 "I"로, 이는 인돌의 형성을 나타냅니다.

이러한 의미에서, tripteína는 영양소의 원천이 될뿐만 아니라 또 다른 기본적인 기능을 수행합니다. 이 펩톤은 트립토판 (tryptophan)이라 불리는 아미노산이 풍부하기 때문에 트립토판 아제 (tryptophanase)를 생산하는 박테리아를 보여줄 수 있습니다.

이 효소는 인돌 (무색 물질), 피루브산 (pyruvic acid) 및 암모늄 (ammonium)의 형성과 함께 아미노산 트립토판을 절단하는 역할을합니다..

따라서이 반응을 입증하려면 노출 물질 (Ehrlich 시약 또는 Kovac 시약)을 추가해야합니다. 어느 쪽이든이 인돌과 반응하여 한천 표면에 고리 모양의 붉은 자색체 물질을 형성합니다. 자홍색 반지가 나타나면 인돌 검사는 양성으로 해석됩니다..

이 효소가없는 박테리아는 고리를 형성하지 않으며 음성 인돌 검사로 해석됩니다.

일단 시약을 첨가하면 흐린 상태가되어 운동성을 시각화하기가 어려우므로 인돌 검사가 마지막으로 해석되어야 함을 지적하는 것이 중요합니다.

운동성

마침내 SIM이라는 단어의 문자 "M"은 운동성을 의미합니다. 운동성을 평가할 수 있으려면이 물질이 박테리아 운동의 유무를 관찰 할 수 있어야하기 때문에 전략적으로 반고 체적입니다. 편모가있는 박테리아는이 긍정적 인 검사를하는 박테리아입니다..

탁도가 관찰 될 때 초기 접종 물과 그 둘레에서 양성 시험이 분명해진다. 한편, 비 이동성 박테리아는 초기 접종 경로에서만 발달한다.

준비

하프 SIM

탈수 된 배지 30g을 달아 증류수 1L에 녹인다. 혼합물을 5 분 동안 방치 한 다음 비등까지 가열하고 완전히 용해 될 때까지 자주 저어 준다..

121 ℃에서 15 분간 면봉과 오토 클레이브로 시험관에 혼합물을 분배한다. 튜브 랙을 오토 클레이브에서 꺼내고 똑바로 세워서 매체가 블록 모양이되도록합니다..

저장을 위해, 그것은 그것이 사용될 때까지 냉장고에 보관됩니다. 준비된 배지는 7.3 ± 0.2의 최종 pH를 가져야한다..

배지를 접종 할 때 실온에 있어야합니다. 매체의 색깔은 베이지 색이다..

코 박스 시약

아밀 또는 이소 아밀 또는 부틸 알콜 150ml를 측정 할 것. (언급 된 세 가지 중 하나를 사용하십시오).

p- 디메틸 아미노 벤즈알데히드 10g을 녹인다. 그런 다음 50ml의 진한 염산.

사용 준비가 된 시약은 무색 또는 담황색입니다. 그것은 호박 병에 보관하고 냉장고에 보관해야합니다. 진한 갈색을 띠면 사용하지 마십시오. 이는 손상되었음을 나타냅니다. 이 시약은 장내 세균을 취급 할 때 선호됩니다..

에를 리치 시약

p- 디메틸 아미노 벤즈알데히드 2g을 달아 무수 에틸 알콜 190ml에 녹이고 진한 염산 40ml와 천천히 혼합한다. Kovac의 시약도 같은 방법으로 보관하십시오. Ehrlich 시약은 비 발효 및 혐기성 박테리아에 더 많이 사용됩니다..

용도

SIM 매체는 세균학 실험실에서 많이 사용됩니다. 동일한 튜브에서 Enterobacteriaceae의 동정시 세 가지 필수적인 특성이 관찰 될 수 있다는 장점이있다.

뿌려졌다.

이 배지를 뿌리는 올바른 방법은 연구 할 순수 식민지의 일부를 취하여 배지의 중심에 수직으로 삽입하는 바늘을 사용하는 것입니다. 단일 추력이 이루어져야합니다. 펑크가 튜브의 바닥에 닿아서는 안되며, 올바른 것은 깊이의 2/3 만 커버하는 것입니다.

그것은 긍정적 인 운동성의 잘못된 해석으로 이어질 수있는 접종을 반복하는 것이 좋습니다되지 않습니다. 접종 된 배지를 37 ℃에서 24 시간 동안 에어로 바이오 시스에서 배양한다..

H 생산이 있었는지 아닌지 관찰 된 시간을 결론 지었다.₂S와 운동성을 읽습니다. 마침내 인돌 (indole)이 드러나고, 에를 리치 (Ehrlich) 또는 코박 (Kovac)의 시약 3-4 방울을 가하면 부드럽게 혼합되어 해석됩니다.

품질 관리

무균 컨트롤로서 하나 또는 두 개의 튜브를 접종하지 않고 37 ° C의 오븐에서 24 시간 동안 배양합니다. 이 시간이 지나면 색의 변화 나 변화가 없을 것으로 예상됩니다..

품질 관리로서 다음과 같은 인증 된 알려진 균주를 사용할 수 있습니다 : 대장균 ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, 살모넬라 티피 무리 움 ATCC 14028, 소아용 소아 즙 ATCC 29930, 프로 테우스 vulgaris ATCC 13315.

예상되는 결과는 다음과 같습니다. 대장균 H₂S 음성, 인돌 및 양성 운동, Enterobacter aerogenes 긍정적 인 운동성 만, 살모넬라 티피 무리 움 H₂S 및 양성 운동성, 음성 인돌. 프로 테우스 vulgaris 모두 긍정적이다. Klebsiella pneumoniae 및 소아용 소아 즙 모두 부정적인.

제한 사항

-어떤 종류의 모르가 넬라 모르 가니, 다른 균주들 중에서도 멜라닌 생성 때문에이 매질에서 갈색의 색소를 생성 할 수 있습니다. 이것은 황화 제 1 철 침전물과 혼동되어서는 안됩니다. 경험이 부족한 전문가의 경우이 상황은 H 테스트의 해석에 오판을 유발할 수 있습니다₂S.

-엄격한 호기성 박테리아는 튜브의 표면에서만 자라기 때문에 운동성을 해석하기가 어렵습니다..

참고 문헌

1. BD 실험실 BBL SIM 매체. 구매 가능 : bd.com
2. Neogen Laboratories SIM 매체. 구매 가능 지역 : foodsafety
3. Difco Francisco Soria Melguizo. SIM 매체. 이용 가능 : http://f-soria.es
4. Brizuela-Lab 실험실 SIM 매체. 구매 가능 지역 : .brizuela-lab.com
5. 영국 실험실. SIM 매체. 구매 가능 지역 : studyres.es/doc
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). 미생물 학적 진단. 5th ed. 편집 Panamericana S.A. 아르헨티나.